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-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Human TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 Protein (GST Tag)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
50 µg
蛋白名称:Human TPL2 / MAP3K8 / MEKK8 Protein (GST Tag)
蛋白构建:A DNA sequence encoding the human MAP3K8 isoform 1 (P41279-1) (Met 30-Arg 397) was fused with the GST tag at the N-terminus.
表达宿主:Baculovirus-Insect Cells
蛋白纯度:> 91 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:Kinase activity untested
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Met
蛋白分子量:The recombinant human MAP3K8/GST chimera consists of 592 amino acids and has a predicted molecular mass of 68 kDa as estimated in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:P41279-1
蛋白氨基酸序列:Met30-Arg397
蛋白标签:N-GST
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验放置48小时,可能会对目的蛋白有影响,因为尿素在碱性条件下可使一些氨基酸酰基化,因而早些处理BI溶液比较好。具体有什么影响我也不是很清楚。 6、GST融合蛋白形成包含体不溶,咋办? GST融合蛋白应该不能用尿素等作用太强的变性剂,否则GST融合蛋白是不能与beads相结合的 GST的Beads是应用酶与底物结合的原理,所以要去除处理因素后才好结合,不知你的温和的去污剂是什么? 做完裂解之后加Triton X-100轻摇30min,蛋白溶解的会多些! 四、包涵体的复性 1、包涵
的蛋白水解酶的活性,加入苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。 这是标准配方: 裂解液:50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 但我个人的经验是:如果你裂解细菌是为了提取蛋白的话,而且蛋白的分子量又小于
化,因而早些处理BI溶液比较好。具体有什么影响我也不是很清楚。 6、GST融合蛋白形成包含体不溶,咋办? GST融合蛋白应该不能用尿素等作用太强的变性剂,否则GST融合蛋白是不能与beads相结合的 GST的Beads是应用酶与底物结合的原理,所以要去除处理因素后才好结合,不知你的温和的去污剂是什么? 做完裂解之后加Triton X-100轻摇30min,蛋白溶解的会多些! 四、包涵体的复性 1、包涵体如何复性 包涵体的复性主要有两种方式: 1,稀释溶液,但是操作的液体量大,蛋白
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