- ￥580 - 19380
- Sino Biological
- 北京
- CT011-H08H
- 2025年08月12日
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北京义翘神州科技股份有限公司
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5.00 µg/20.00 µg/50.00 µg/500.00 µg
| 规格： | 5.00 µg | 产品价格： | ￥580.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 20.00 µg | 产品价格： | ￥1980.0 |
| 规格： | 50.00 µg | 产品价格： | ￥2980.0 |
| 规格： | 500.00 µg | 产品价格： | ￥19380.0 |
蛋白名称：Human IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) Protein (His Tag)
蛋白构建：A DNA sequence encoding the p35 subunit of human IL-12, termed as IL12A (P29459-1) (Met1-Ser219) was fused with a polyhistidine tag at the C-terminus, constructed the plasmid 1; A DNA sequence encoding the p40 subunit of human IL-12, termed as IL12B (NP_002178.2) (Met1-Ser328) was fused with a polyhistidine tag at the C-terminus, constructed the plasmid 2. The two plasmids were co-expressed and the heterodimer was purified.
表达宿主：HEK293 Cells
蛋白纯度：≥ 95 % as determined by SDS-PAGE. ≥ 95 % as determined by SEC-HPLC.
蛋白活性：Measured by its ability to induce Interferon gamma secretion by human natural killer lymphoma NK-92 cells. The ED50 for this effect is typically 0.04-0.4 ng/mL.
蛋白内毒素：< 5 EU per mg of the protein.
预测N端：Arg 23 & Ile 23
蛋白分子量：The recombinant IL12 heterodimer of human IL12A/IL12B comprises 525 (208+317) amino acids and has a calculated molecular mass of 60.13 (23.99+36.14) kDa.
蛋白NP号：P29459-1 & NP_002178.2
蛋白氨基酸序列：Met1-Ser219 & Met1-Ser328
蛋白标签：C-His
蛋白保存条件：Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验His 标签蛋白纯化效果不理想，宝宝心里苦呀。今天，小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的His标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面： 1、His标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高，容易导致蛋白炭化；功率过低，蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率，同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素，如：金属离子螯合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时，优化缓冲液的pH、盐
行 HIS 标签的捕获。 2、HIS标签蛋白结合了，但是洗脱不充分 原因一 洗脱条件太温和。 建议 增加咪唑的浓度或选择咪唑线性梯度洗脱，或者通过降低 pH 寻找最佳洗脱条件。需要注意的是，pH 低于 3.5 容易导致镍离子脱落。 原因二 蛋白柱上沉淀。 建议 1 降低蛋白浓度。可以减少上样量，或者采用咪唑线性而非步级梯度洗脱，增加蛋白稀释度。 建议 2 试用去污剂或者改变 NaCl 的浓度，或者使用变性剂 (4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素） 在变性条件下洗脱。 原因三 非特异性的疏水或者其他相互
的BL-21 / pET32a（+）/ pTBO超声处理后的上清液; 泳道3：诱导BL-21 / pET 32a（+）/ pTBO超声处理后沉淀; 泳道4：BL-21 / pET 32a（+）/ pTBO超声处理诱导5小时后的上清液。pTBO融合蛋白的分子量约为22kDa。经验对于原核物种中的异源蛋白质表达，首先，我们需要优化通常用于大肠杆菌的密码子。其次，在培养基中加入IPTG后，让培养物生长不同的时间点，如3小时，6小时，12小时18小时，并在37°C，30°C，21°C或不同的温度下尝试不同
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