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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
DNase I recombinant,RNase-free
- 保质期:
1年
- 保存条件:
-20°C
- 库存:
30⁺瓶
- 供应商:
上海睿安生物19121878899
- 规格:
10000units/瓶
热销Roche货号04716728001重组DNase I(无RNase)上海睿安生物Roche授权代理19121878899
Roche货号4716728001,(规格10000units/瓶)╳目录单价¥3919.26元
Roche货号04716728001,(规格10000units/瓶)╳目录单价¥3919.26元
重组DNase I,无RNase
from bovine pancreas,expressed in Pichia pastoris

属性
生物来源:bovine pancreas
质量水平:100
重组:expressed in Pichia pastoris
表单:solution
分子量:~39 kDa
包装:pkg of 10000 U
制造商/商品名称:Roche
最佳pH:7.0-8.0
溶解性:water:soluble
说明
一般描述
重组DNase I是一种DNA特异性内切酶。该酶可通过水解连接到DNA上的磷酸二酯而催化双链及单链DNA的随机降解,形成寡核苷酸和单核苷酸的混合物。重组DNase I的生产过程中所使用的所有材料都无动物来源,因而可形成无动物源产物。
内容物
-
重组DNasae I,不无RNase,10U/μl -
孵育缓冲液,10╳浓度
应用
在对RNase较为敏感的应用中,可采用无RNase的重组DNase I降解DNA。例如,DNase I常用于:
-
在RT-PCR之前去除RNA中的基因组DNA -
在体外转录反应之后分离不含DNA的RNA -
进行缺口翻译 -
在真核DNA中定位DNase敏感的区域
生化/生理作用
热灭活:一单位无RNase重组DNase I可在75°C孵育10分钟进行热灭活。
重要提示:无RNase重组DNase I也可根据标准实验方案通过酚提取进行灭活并去除,如分子生物学中的现有实验方案。
特点和优势
糖基化形式
重组DNase I异质性N端糖基化,因此会在电泳时呈现两条带。
二价离子要求
DNase I需要二价阳离子以实现最高活性。DNA特异性内切酶通过镁离子等离子激活,并由钙离子刺激。因此,酶会受到EDTA等金属螯合剂抑制。
-
可从任意RNA样品中去除DNA污染 -
未检测出RNase或蛋白酶活性 -
可热灭活,因而免去了有机提取的必要 -
通过优化的孵育缓冲液进行运输,以最大限度维持DNase活性 -
完全无动物来源过程生产,去除了动物来源材料相关的任何风险
包装:1个试剂盒包含2种组分
制备说明
激活剂:二价金属离子
工作溶液:
储备溶液:20mM Tris-HCl,50mM NaCl,2mM CaCl2,2mM MgCl2,1mM二硫赤藓糖醇,0.1mg/ml Pefabloc SC,50%甘油(v/v),pH 7.6(4°C)。
孵育缓冲液(10╳):400mM Tris-HCl,100mM NaCl,60mM MgCl2,10mM CaCl2,pH 7.9。
酶稀释液:25mM Tris-HCl,50%甘油(v/v),pH 7.6(4°C)。
将未稀释的酶溶液-15至-25°C储存;缓冲液4°C储存。
分析说明
杜绝污染:每批次都按照现有质检工艺检测以确保无RNase及蛋白酶。
其他说明
一单位指的在1ml的检测条件下可造成260nm处吸光值提高0.001/min的酶活性。
反应条件:
根据以下检测混合物测定体积活性。将100μg小牛胸腺DNA与40至70单位的无RNase重组DNase I在1╳孵育缓冲液中+25°C下孵育。测定260nm处吸光度增量。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
同行评审论文(部分:文献)








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溶解性:water:soluble
说明
一般描述
重组DNase I是一种DNA特异性内切酶。该酶可通过水解连接到DNA上的磷酸二酯而催化双链及单链DNA的随机降解,形成寡核苷酸和单核苷酸的混合物。重组DNase I的生产过程中所使用的所有材料都无动物来源,因而可形成无动物源产物。
内容物
-
重组DNasae I,不无RNase,10U/μl -
孵育缓冲液,10╳浓度
应用
在对RNase较为敏感的应用中,可采用无RNase的重组DNase I降解DNA。例如,DNase I常用于:
-
在RT-PCR之前去除RNA中的基因组DNA -
在体外转录反应之后分离不含DNA的RNA -
进行缺口翻译 -
在真核DNA中定位DNase敏感的区域
生化/生理作用
热灭活:一单位无RNase重组DNase I可在75°C孵育10分钟进行热灭活。
重要提示:无RNase重组DNase I也可根据标准实验方案通过酚提取进行灭活并去除,如分子生物学中的现有实验方案。
特点和优势
糖基化形式
重组DNase I异质性N端糖基化,因此会在电泳时呈现两条带。
二价离子要求
DNase I需要二价阳离子以实现最高活性。DNA特异性内切酶通过镁离子等离子激活,并由钙离子刺激。因此,酶会受到EDTA等金属螯合剂抑制。
-
可从任意RNA样品中去除DNA污染 -
未检测出RNase或蛋白酶活性 -
可热灭活,因而免去了有机提取的必要 -
通过优化的孵育缓冲液进行运输,以最大限度维持DNase活性 -
完全无动物来源过程生产,去除了动物来源材料相关的任何风险
包装:1个试剂盒包含2种组分
制备说明
激活剂:二价金属离子
工作溶液:
储备溶液:20mM Tris-HCl,50mM NaCl,2mM CaCl2,2mM MgCl2,1mM二硫赤藓糖醇,0.1mg/ml Pefabloc SC,50%甘油(v/v),pH 7.6(4°C)。
孵育缓冲液(10╳):400mM Tris-HCl,100mM NaCl,60mM MgCl2,10mM CaCl2,pH 7.9。
酶稀释液:25mM Tris-HCl,50%甘油(v/v),pH 7.6(4°C)。
将未稀释的酶溶液-15至-25°C储存;缓冲液4°C储存。
分析说明
杜绝污染:每批次都按照现有质检工艺检测以确保无RNase及蛋白酶。
其他说明
一单位指的在1ml的检测条件下可造成260nm处吸光值提高0.001/min的酶活性。
反应条件:
根据以下检测混合物测定体积活性。将100μg小牛胸腺DNA与40至70单位的无RNase重组DNase I在1╳孵育缓冲液中+25°C下孵育。测定260nm处吸光度增量。
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液 IPES 0.134g、0.5M EDTA(pH8.0)20μl、5M NaCl 0.8ml、甲酰胺8ml,加DEPC H2O至10ml。3. RNase消化液:5M NaCl 120μl、1M Tris-HCl(pH7.4) 20μl、0.5M EDTA(pH8.0)20μl、RNase A(10mg/ml) 8μl、RNase T1(250U/μl) 1μl,加DEPC H2O至2ml二、操作步骤1.反义RNA可由含T7或SP6启动子的重组质粒为模板制备,也可以用含启动子的PCR产物为模板制备
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