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- 详细信息
- 询价记录
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
Solution Endotoxin Erasol
- 库存:
860
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
液相内毒素清除剂产品及特点:
去除液体生物样品(包括质粒DNA样品)中污染的内毒素(endotoxin)具有重要的临床意义,因为内毒素对原代细胞、传代细胞和整体动物均具有显著的毒性作用。由于内毒素(化学本质为脂多糖,即lipopolysaccharides)是包括E.coli在内的革兰氏阴性细菌细胞壁的主要组成成分,并且带电性跟DNA类似,所以从E.coli细胞中提取的质粒DNA和重组蛋白质药物中常常含有大量的内毒素污染,并且很难用用常规方法(包括硅胶膜吸附,离子交换吸附、凝胶排阻过滤、氯化铯超速离心)去除。本产品就是专门用于高效去除生物样品中的内毒素污染。
1.简单快速,一次处理只需要20分钟左右,不需要复杂仪器设备。
2.高效,一次处理可以去除90%以上的内毒素,经过三次重复抽提可将内毒素的水平降低到0.2EU(endotoxinunit,约0.1ngLPS)/mL以下。
3.适用范围广,可用于DNA、RNA、蛋白质或其他生物样品。
4.不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性,处理过的质粒DNA可用于转染实验。
5.既可小规模使用(在1.5mL离心管内),也可放量使用。

液相内毒素清除剂运输及保存:
常温运输,4℃保存,有效期一年。
自备试剂:无内毒素的水或TE缓冲、3M醋酸钠、乙醇
液相内毒素清除剂使用方法
如果使用前本产品有分层,冰浴后振荡混匀。
一:用于体积小于500uL的DNA/RNA样品
1.在一干净的离心管中加入500uL的样品。如果不足500uL,可以用水或TE补足。
2.加入50uL的3M醋酸钠(pH5.2),混匀后冰浴5分钟。
3.加入50uL预冷的本产品,充分混匀后冰浴10分钟。
4.65℃水浴直到溶液变浊或出现分层为止(一般需要1-5分钟)。5.室温12000-15000×g离心2分钟(不能低温离心),离心后上层为无色透明,下层为淡蓝色。
6.将上清转移到新的离心管中。
7.如果需要,可以重复步骤3~6。
8.加1倍体积的或两倍体积的乙醇,混匀,12000-15000×g离心30分钟。
9.弃上清后用70%酒精洗2次。
10.空气干燥沉淀后加入100uL无内毒素的水或TE缓冲液溶解沉淀。
11.测定DNA和内毒素的含量,与未纯化的样品比较。
液相内毒素清除剂二:用于体积大于500uL的DNA/RNA样品整个操作同上,只是在15或50mL塑料离心管中进行,离心速度不能超过离
心管的承受力。
液相内毒素清除剂三:整合到碱变性法质粒DNA制备过程中整个操作同上,只是:
1.样品必须是加溶液III离心后得到的上清液或最后得到的质粒溶液。
2.如果处理的是加溶液III离心后得到的上清液,可以略去第2步操作。
3.处理后的溶液需要用试剂盒提供的或自备的上柱液调整盐离子浓度,然后上柱,以后的操作按试剂盒提供的操作手册进行。
4.洗脱DNA所用水或溶液必须无内毒素污染。
液相内毒素清除剂四:对蛋白质和其它生物样品整个操作同上,只是:
1.略去第2步操作,加3M醋酸钠(pH5.2)只为沉淀核酸。
2.第4步改为37℃保温以免蛋白质变性,溶液呈混浊状或分相一般需要20-30分钟。
3.略去第8步和以后操作。
液相内毒素清除剂常见问题
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同,所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附,离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子),能够形成大小不等的聚合物,跟质粒DNA和蛋白质大小接近,所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。

液相内毒素清除剂相关产品:
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1.简单快速,一次处理只需要20分钟左右,不需要复杂仪器设备。
2.高效,一次处理可以去除90%以上的内毒素,经过三次重复抽提可将内毒素的水平降低到0.2EU(endotoxinunit,约0.1ngLPS)/mL以下。
3.适用范围广,可用于DNA、RNA、蛋白质或其他生物样品。
4.不影响DNA和绝大部分蛋白质的活性,处理过的质粒DNA可用于转染实验。
5.既可小规模使用(在1.5mL离心管内),也可放量使用。

液相内毒素清除剂运输及保存:
常温运输,4℃保存,有效期一年。
自备试剂:无内毒素的水或TE缓冲、3M醋酸钠、乙醇
液相内毒素清除剂使用方法
如果使用前本产品有分层,冰浴后振荡混匀。
一:用于体积小于500uL的DNA/RNA样品
1.在一干净的离心管中加入500uL的样品。如果不足500uL,可以用水或TE补足。
2.加入50uL的3M醋酸钠(pH5.2),混匀后冰浴5分钟。
3.加入50uL预冷的本产品,充分混匀后冰浴10分钟。
4.65℃水浴直到溶液变浊或出现分层为止(一般需要1-5分钟)。5.室温12000-15000×g离心2分钟(不能低温离心),离心后上层为无色透明,下层为淡蓝色。
6.将上清转移到新的离心管中。
7.如果需要,可以重复步骤3~6。
8.加1倍体积的或两倍体积的乙醇,混匀,12000-15000×g离心30分钟。
9.弃上清后用70%酒精洗2次。
10.空气干燥沉淀后加入100uL无内毒素的水或TE缓冲液溶解沉淀。
11.测定DNA和内毒素的含量,与未纯化的样品比较。
液相内毒素清除剂二:用于体积大于500uL的DNA/RNA样品整个操作同上,只是在15或50mL塑料离心管中进行,离心速度不能超过离
心管的承受力。
液相内毒素清除剂三:整合到碱变性法质粒DNA制备过程中整个操作同上,只是:
1.样品必须是加溶液III离心后得到的上清液或最后得到的质粒溶液。
2.如果处理的是加溶液III离心后得到的上清液,可以略去第2步操作。
3.处理后的溶液需要用试剂盒提供的或自备的上柱液调整盐离子浓度,然后上柱,以后的操作按试剂盒提供的操作手册进行。
4.洗脱DNA所用水或溶液必须无内毒素污染。
液相内毒素清除剂四:对蛋白质和其它生物样品整个操作同上,只是:
1.略去第2步操作,加3M醋酸钠(pH5.2)只为沉淀核酸。
2.第4步改为37℃保温以免蛋白质变性,溶液呈混浊状或分相一般需要20-30分钟。
3.略去第8步和以后操作。
液相内毒素清除剂常见问题
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同,所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附,离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子),能够形成大小不等的聚合物,跟质粒DNA和蛋白质大小接近,所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。

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| 非冻型细菌 RNA 保存液 |
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| 水样病毒沉淀剂 |
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液相内毒素清除剂
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