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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
24
- 英文名：
RNA 级 Oligo(dT) 纤维素
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
25mg
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列，5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是RNA 级 Oligo(dT) 纤维素25mg费用的相关产品：
非变性蛋白分子量标准25mg Hydroxystilbamidine 10mg
蛋白质电泳分子量标准 (3.3-20.1KD)15 次 HRP 标记的兔抗 GST 标签多抗20μL
蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)20 次 HRP 标记的抗生物素抗体10μL
蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0KD)10 次 His 标签蛋白专用蛋白酶抑制剂10mL
预染蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)10 次 Hemoglobin(NO 清除剂 )1g
m7G(5´)ppp(5´)A 帽结构类似物25 OD 电泳级 SYBR Green I50μL
G(5´)ppp(5´)A 帽结构类似物25 OD 电泳级 MOPS100g
G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD 第五章 核酸扩增产品
3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽结构类似物25 OD 第四章 探针标记及检测产品
NTP 溶液，10mM0.5mL 第三章 “归去来”核酸电泳及回收产品
单细胞全转录组扩增试剂盒 24 次 蛋白质电泳分子量标准 (3.3-20.1KD)15 次
单细胞裂解液 (DNA)1mL 蛋白质电泳分子量标准 (14.4-97.4KD)20 次
单细胞裂解液 (RNA)1mL 蛋白折叠试剂盒100 次
单细胞悬浮液1mL 蛋白酶抑制剂混合液2×0.5mL
胚胎裂解液1mL 蛋酸酶抑制剂混合液 21mL
DTA培养基 英文名称； Dextrose Tryptone Agar Medium 规格； 250g
弯曲杆菌检验培养基 英文名称； 规格；
布氏肉汤 英文名称； Brucella Broth 规格； 250g
改良Skirrow氏琼脂基础 英文名称； Skirrow Agar Base ,Modified 规格； 250g
改良Camp-BAP氏琼脂基础 英文名称； Camp-BAP Agar Base,Modified 规格； 250g
军团菌检测培养基
GVPC琼脂基础 GVPC Agar Base 100g
BCYE琼脂基础 BCYE Agar Base 100g
GVPC琼脂基础添加剂 5支/套
BCYE-CYS琼脂基础 BCYE-Cys Agar Base 100g
RNA 级 Oligo(dT) 纤维素25mg费用TSA培养基平板（9cm） 用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测
RODAC培养皿（TSA）（55mm） 用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测
改良Skirrow氏琼脂平板（9cm） 用于弯曲杆菌的分离培养用于弯曲杆菌的分离培养
甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板（9cm） 用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数
操作步骤:
1. RNA 级 Oligo(dT) 纤维素25mg费用匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
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文献和实验与rRNA，5SRNA,5.8SRNA和tRNA相比，大多数真核生物的mRNA在其3’端带有poly（A）尾巴，因此mRNA能用oligo（dT）-纤维素亲和层析法从细胞总RNA中分离。本文中介绍的方法是利用带有poly（A）尾巴的mRNA能与连在纤维素介质上的短链oligo（dT）形成稳定的RNA-DNA杂合链的原理。poly（A）+RNA能用oligo（dT）层析柱选择洗脱，也能分批洗脱，即批量层析的方法。详情请查看下列pdf文件：“oligo（dT）-纤维素层析法提取po
Selection of Poly(A)+ RNA by Oligo(dT)-Cellulose Chromatography Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, Australia David W
Synthesis of Radiolabeled, Subtracted cDNA Probes Using Oligo(dT) as a Primer
2. To the chilled microfuge tube, add: 0.1 M dithiothreitol 2.5 μl placental RNase inhibitor 200 units oligo(dT)12-18 10 μl 10x reverse transcriptase buffer 25 μl 20 mM solution of dGTP, dATP, and dTTP 10 μl 125 μM dCTP 10 μl 10 mCi/ml
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