使用本试剂盒,目标质粒扩增产物经DpnI消化、重组环化后直接进行转化即可完成定点突变。该试剂盒由两个模块组成: Pfu DNA Polymerase扩增模块和快速克隆模块。Pfu DNA Polymerase超高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性,其卓越的长片段扩增能力,广泛适用于长度小于20 kb的任何质粒扩增。快速克隆系统利用高效的同源重组反应替代传统的退火成环反应。因此使用本品进行DNA定点突变时,引物设计更加灵活,且扩增反应不再需要以线性方式进行,极大减少了模板使用量,有利于原始甲基化模板的彻底降解。可以高效完成两个PCR产物的无缝拼接,因此该试剂盒还能以单次扩增的方式对目标质粒上不连续的两个位点同时进行突变。