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北京现货一管式定点突变试剂盒厂
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One Tube Site-specific Mutagenesis Kit
362
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货一管式定点突变试剂盒厂家直销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货一管式定点突变试剂盒厂家直销编号:ALH355产地:国产|进口品牌:百奥莱博规格:10次|20次本试剂盒是基于PCR原理向目的DNA片段(一般为质粒)中引入碱基的点突变,多个邻近密码子的突变,单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)等。一般宿主菌培养扩增的质粒DNA是甲基化的,PCR扩增新合成的DNA是非甲基化的。首先以待突变的甲基化质粒为模板,利用超快高保真的SuperPfu聚合酶实现突变质粒的合成(非甲基化,包含突变点,且有两个缺刻点nick点),再利用Dpn I酶选择性降解甲基化的模板质粒 ,剩下的新合成非甲基化的突变质粒转入大肠杆菌后,质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复,得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。一般可以产生大于90%的突变效率。本试剂盒适用于<12kb甲基化质粒中核苷酸的突变。试剂盒组分(10次):SuperPfu DNA polymerase——————5μl10×SuperPfu Buffer————————100μlDpn I——————-——————-——5μl10mM dNTP Mixture-——————-——25μl试剂盒特点:1、简单,一个PCR管中完成所有操作,速度最快。2、采用部分重叠引物设计,使PCR呈指数扩增,扩增产物凝胶电泳可见增加成功率。3、效率高,使用Dpn I去除非突变模板,突变效率高达90%;不需要使用特殊感受态细胞降解非突变质粒。4、采用分子进化改造的SuperPfu可以提供4倍-6倍于pfu的扩增速率提高和3倍于pfu的超高保真性。储存条件:-20℃,有效期一年。本品别名:一管式定点突变试剂盒|一管式突变试剂盒更多有关北京现货一管式定点突变试剂盒厂家直销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:·柱式质粒小量提取试剂盒编号:ALH075英文名称:Plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)规格:100次|200次本试剂盒适用于小规模质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。试剂盒组份(100次):RNaseA(10mg/ml)————————250μl溶液P1—————————————25ml溶液P2—————————————25ml溶液P3—————————————35ml漂洗液WB————————————25ml洗脱缓冲液EB——————————15ml吸附柱和收集管(2ml)———————100套试剂盒特点:1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2.快速、方便,不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好, 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。注意事项1. 本试剂盒适用菌株为XL-1 Blue和DH5α等核酸酶含量低缺陷型菌株。所用菌株为JM系列、HB101等endA菌株或野生型菌株,核酸酶含量丰富,应购买本公司生产的高纯度质粒小量快速提取试剂盒。2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。3. 溶液P3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。4. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒,建议接种单菌落于1.5~4.5ml加合适抗生素的LB培养基, 过夜培养14~16个小时,可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒,应适当加大菌体使用量,使用5~10ml过夜培养物,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,其它步骤相同。5. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。6. 质粒DNA确切分子大小, 必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱,但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。储存条件:室温,有效期12个月。北京现货一管式定点突变试剂盒厂家直销关键词:一管式定点突变试剂盒,一管式突变试剂盒·RNA保存液(长期保存RNA)编号:ALH062英文名称:RNA long-term preservation solution规格:2ml本品可以允许RNA在4℃过夜或-20℃保存至少1 年而免于降解。RNA 长期保存液是RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择。需要时可用常规乙醇法沉淀回收RNA,或直接吸取储存于RNA 溶解保护液中的高浓度RNA(可达4 mg/ml)进行RNA 电泳、Northern Blot。用RNA长期保存液溶解RNA沉淀:1. 对固体RNA 沉淀,每0.4-4μg RNA 沉淀加入1μl RNA 长期保存液,反复吹打混匀或者室温振荡15-30 分钟溶解沉淀。干燥的RNA 沉淀难以溶解,可反复吹打混匀后50℃加热10-15 分钟。最好先用小体积无RNase 的TE 或水溶解RNA沉淀,然后按液态RNA 操作。2. 对液态RNA 溶液,每0.4-4μg RNA 溶液加入1μl RNA 长期保存液,混匀。注意混合液中RNA 长期保存液的体积百分比不低于80%。3. 测定OD 值。注意加入相应量的RNA 长期保存液做空白。4. 将溶解的RNA 样品储存于-20℃或者-70 ºC。从RNA长期保存液中沉淀RNA:1. 估计RNA 溶液终体积。加入4 倍体积的无水乙醇,混匀。如果溶液体积过小操作不便,可加入RNase free water 稀释RNA 溶液,如果溶液中RNA 含量低于0.25μg/μl,可加入5M NaCl(RNase free) 至终浓度0.2M,混匀,然后再加入4 倍体积乙醇。2. 室温放置5 分钟。3. 12000rpm,5 min。弃上清。风干,溶解。4. 重新沉淀的RNA 溶解后可用于RT-PCR 反应。也可用于任何其他实验。直接使用RNA长期保存液中的RNA:直接吸取RNA长期保存液中的RNA,进行普通或甲醛变性电泳和Northern Blot。进行甲醛变性电泳时,最后上样的样品中的RNA长期保存液的浓度可高达50%。附:甲醛变性电泳样品准备: 临用前,混合水(87μl),甲醛(81μl), 50%甘油/含0.25 mg/ml *芬兰(48μl) 和20X MOPS (24μl). 将上述混合液和RNA 长期保存液中的RNA 样品等体积混合,55℃温育10 分钟,按照标准的甲醛变性电泳过程上样。注意事项:1. RNA 长期保存液可能抑制逆转录酶活性,做RT-PCR 反应前应该用乙醇沉淀RNA。2. 在RNA 长期保存液中的RNA 的终浓度不应该超过4μg/μl。储存条件:4℃北京现货一管式定点突变试剂盒厂家直销关键词:一管式定点突变试剂盒,一管式突变试剂盒*化*溶液(1mol/L) 500ml胃蛋白酶抑制剂 D-Cysteine 26305-03-3ARB13285 小鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)酶免分析 Mouse skeletal muscle actinin-α,sm actinin-α ELISA KITBTN131143 AMPPD AMPPDF030209 HRP标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*HRP过氧化物酶染色液(氧化WG-KI法) 2×10ml|2×20mlARB10873 人抗透明带抗体(AZP)"灿烂黄 Dithiooxamide 3051-11-4ARB10211 人β内酰胺酶抑制剂(BLI)elisa检测说明书 Human β-lactamase inhibitors,bli ELISA KIT还原型谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒(DTNB速率微板法) 100T谷丙转*酶 SDS 9000-86-6SJ0857 胎牛血清(无支原体)2-(N-吗*(代"啡")啉)乙磺酸 Benzethonium chloride 145224-94-8酸性蛋白酶 SP Sephadex C-50 9025-49-4HC0179 蓝盖玻璃瓶PY02-192 卵黄高盐琼脂基础 250克 (S)-2-*基甘*酸甲酯盐*(代"酸")盐 Amikacin sulfate salt 13226-98-7ARB10796 人抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)酶标法分析 Human anti-cardiolipin antibody iga,aca-iga ELISA KIT
我公司强烈推荐克隆与表达系列产品,热情期待您的咨询选购北京现货一管式定点突变试剂盒厂家直销。
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