- ￥100 - 2000
- xuanya
- 中国/美国
- XY-TE-0061
- 2025年09月22日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输和保存
- 保质期：
两年
- 英文名：
Column Bacterial RNAOUT
- 库存：
100
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
本产品是xuanya细菌RNAout的柱式升级产品，用于快速从各种常见的中提取总RNA。
柱式细菌RNA-DNA双提试剂盒跟细菌RNAout相比它具有下列特点:
1. 操作更加简单快速，省去了最费时的离心步骤。一般只需30-40分钟完成。
2. 既可用于革氏阴性细菌，也可用于革氏阳性细菌。
3. 所得RNA纯度更高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4. 一般不含基因DNA和蛋白质污染。
5. 性价比高于进口同类产品，适用于各种革氏阴性细菌。
6. 可用于后续RT-PCR、Northern Blot、芯片分析、体外翻译、polyA筛选和RNase保护分析等试验。
柱式细菌RNA-DNA双提试剂盒运输及保存：
常温运输，收到货后，溶液 A 长期保存需要放 4℃，溶菌酶干粉长期保存需要放-20℃，有效期一年。
自备试剂：氯仿。
柱式细菌RNA-DNA双提试剂盒使用方法
注意：试验所用的实验室环境、耗材等均需要 RNase-free。操作步骤是针对 在 1.5 mL 塑料离心管中进行的微量提取。
1. 新鲜配制溶菌酶溶液：根据样品数量用自备的 TE 缓冲液和本试剂盒提供的溶菌酶干粉配制合适体积的、浓度为 4mg/mL 的溶菌酶溶液，放冰 上待用。一次革氏阳性细菌 RNA 小量提取需要 100uL 溶菌酶溶液，一 次革氏阴性细菌 RNA 小量提取需要 10uL 溶菌酶溶液。未用完的溶菌酶 溶液不建议保存后重复使用。
2. 在 1.5 mL 塑料离心管中离心收集 0.2-1.5 mL 新鲜细菌（细菌总数不 得超过 1×10E9 个细菌）。注意:由于细菌 RNA 半衰期十分短，只有 2-5 分钟，所以必须使用最新鲜的、处于对数生长期的细菌才能提到高 质量的 RNA。细菌必须立即使用，不能静置。
3. 吸尽液体培养基，如果是革氏阳性细菌，则加入 100uL 第 1 步制备的 4mg/mL 的溶菌酶溶液，彻底重悬细菌，常温放置 5-10 分钟。如果是 革氏阴性细菌，则加入 90uL TE 缓冲液和 10uL 第 1 步制备的 4mg/mL 的溶菌酶溶液，彻底重悬细菌，常温放置 3-5 分钟。
4. 加入 0.3mL 溶液 A，用枪充分吹打细菌沉淀，确保细菌全部裂解，没有 块状物。此时裂解物总体积是 0.4mL。
5. 加入约 0.2 倍体积的自备氯仿(10.4mL 裂解物需 0.1 mL 氯仿)，振荡器 上充分振荡混均 30 秒。
6. 12000-15000 g 室温离心 3 分钟。
7. 将上清液（约 0.3mL）转移到离心吸附柱中。注意：离心后下层有机相 和中间层含有 DNA 和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和 DNA 污 染。
8. 加入等体积（约 0.3mL）的溶液 B，充分混匀后全部上柱。
9. 12000-15000 g 室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
10. 加 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中 的 穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品 OD260/280 比 值不高，可以再用 0.3 mL 通用洗柱液重复此步一次。
11. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗 柱液会影响 RNA 的使用。
12. 将离心吸附柱转移到一自备的 RNase-free 收集管中，加入 30-100 uL RNA 洗脱液，室温放置两分钟。
13. 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于 -80℃待用。
柱式细菌RNA-DNA双提试剂盒14. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使 用甲醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子 （BioTechniques，28：414，2000）。
15. RNA 产量产率测定：将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之 间)检测其在 OD260 的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA 浓度（1 OD260 的 RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度 X 体 积)和产率(RNA 产量/组织用量)。
16. RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则 分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。
柱式细菌RNA-DNA双提试剂盒相关产品：
| EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白级 |
| EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白级 |
| 水蛭素溶液，2mg/mL |
| 亮抑蛋白酶肽溶液，10 mg/mL |
| 木瓜蛋白酶抑制剂溶液，0.5 mg/mL |
| 胃蛋白酶抑制剂溶液，1 mg/mL |
| 膦酰二肽溶液，10mg/mL |
| PMSF 溶液，10mg/mL |
| CHAPS |
| 辛甲基 β 葡糖苷 |
| 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG) |
| n- 十二烷基 -β-D- 麦芽糖苷 |
| 脱氧胆酸钠 |
| 胆酸钠 |
| 十二烷基磺酸钠 |
| 去垢剂去除树脂 |
| 十二烷基磺酸钠清除剂 |
| β- 巯基乙醇，蛋白级 |
| DTT，蛋白级 |
| DTT，免称量蛋白级 |
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验文献速递：传染病监控新方式？利用废水监测网络追踪腹泻病毒和痘病毒
前处理的污水中提取病毒及细菌的RNA和DNA。该试剂盒采用IRT技术高效去除污水中常见的金属离子、有机物等抑制剂，纯化得到的高质量核酸高度适合下游核酸检测。 参考文献： [1] Zheng X, et al. Tracking diarrhea viruses and mpox virus using the wastewater surveillance network in Hong Kong. Water Res. 2024.
被有效裂解。解决方法：可用经典碱裂解法抽提质粒 DNA 方法中的 II 液替代 Solution II 使用。 3.出现严重的 RNA 污染？ （1）未在 Solution I 中事先加入 RNase A1。解决方法：补加 RNase A1。 （2）加入 RNase A 1的 Solution I 长期保存于室温，导致 RNase A1 活性下降。 （3）细菌过量, RNase A1 不能有效降解 RNA。解决方法：将细菌用量减半或增加 RNase A1 在 Solution I 中
g/mL 无 DNA 酶的 RNA 酶，37 ℃ 温育 1 h，以除去残留的 RNA。6. 重复步骤 4、5。1 g 细胞大约能提取到 2 mg DNA。（二）从植物组织中提取基因组 DNA【实验试剂与器材】1. CTAB 抽提液：2% (w/v) CTAB (十六烷基三甲基溴化铵)，100 mM Tris.Cl，pH8.0， 20 mM EDTA，pH8.0，1.4M NaCl2. CTAB/NaCl 溶液：10% CTAB，0.7M NaCl配制方法：在 80 mL 双蒸水中溶解 4.1 g
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
