- ￥2800
- YLKBIO
- YLK-PCR0227
- 国产
- 2026年04月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
Column Bacterial DNAOUT
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
常温运输及保存
- 规格：
50T
本产品是在细菌 DNAOUT 基础上开发的柱式升级产品，可以用于绝大多数革氏阳性和阴性细菌基因组 DNA 的快速提取。
- 操作简单，整个过程不到 20 分钟。
- 产率一般在 5-20 μg/mL 过液培养的饱和菌液（108-109 个细胞）。
- OD260/280 一般在 1.8 以上，可直接用于 PCR、酶切、杂交等实验。
- DNA 片段长度一般在 40-50 Kb 左右。
- 每次提取可以处理 0.1-1.5 mL 的细菌，也可以使用菌落。
- 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
- 安全无毒，本试剂盒对人体无害，无腐蚀性和刺激性气味。
规格及成分
| 成 份 | 大纸盒包装 |
| 溶菌酶干粉 | 600 mg |
| 柱式细菌 DNAOUT溶液 A | 15 mL |
| 柱式细菌 DNAOUT溶液 B | 7.5 mL |
| 柱式细菌 DNAOUT溶液 C | 30 mL |
| 离心吸附柱 | 50 套 |
| 通用洗柱液 | 50 mL |
| DNA 洗脱液 2.0 | 10 mL |
| 使用手册 | 1 份 |
运输及保存
常温运输及保存（溶菌酶干粉需要 4℃或-20℃保存），有效期一年。
自备试剂
氯仿、自备无菌水。
使用方法
注意：溶液 A 和溶液 B 容易产生沉淀，溶液 B 十分粘稠，均需要放置在 65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。
一: 对革氏阴性细菌样品， 不需用溶菌酶
- 将 0.1-1.5 mL 过夜培养的菌液转移到 1.5 mL 塑料离心管中， 12,000 rpm 室温离心 1 分钟沉淀细菌，弃上清。
- 加入 300 μL 预热的溶液 A 到细菌沉淀中，充分吹打均匀。
- 再加入 150 μL 预热的溶液 B 到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。由于溶液 B 比较粘稠，可以采取称量方法取用，150 μL 约等于 150-160 mg。也可以将 1 mL 枪头剪去一截再吸取。
- 加入 200 μL 自备氯仿，震荡混匀 10-30 秒，此时溶液将呈乳白色。
- 12,000 rpm 室温离心 2 分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的 1.5 mL 塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
- 加入 1.5 倍体积(约 0. 7 mL)的溶液 C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中， 室温放置至少 2 分钟。
- 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
- 将 0.5 mL 通用洗柱液加入离心柱中，12,000 rpm 室温离心 1 分钟，弃穿透液。
- 重复上步操作一次。
- 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的 1.5 mL 离心管中。
- 加 50-100 μL 通用洗脱液，室温放置 3-5 分钟。
- 12,000 rpm 室温离心 1 分钟即得 DNA 溶液。
- 由于本产品使用的离心吸附柱吸附 DNA 的能力较强，可以重复上步操作一次以便得到更多的 DNA。
- 直接取 5-10 μL 电泳检测 DNA，其余放冰箱备用。二: 对革氏阳性细菌样品，需用溶菌酶
- 将 0.1-1.5 mL 过夜培养的革氏阳性细菌 12,000 rpm 室温离心 1 分钟后, 重悬于 0.6 mL 溶菌液中（溶菌液配制:30 mL 无菌水+600 mg 溶菌酶，配制后最好分装成小管并放-20℃长期保存，每次只用一小管)，颠倒混匀 5-10 次后放 37℃保温至少 30 分钟(有的革氏阳性菌种可能需更长时间，需要自己根据不同的细菌摸索)。
- 12,000 rpm 室温离心 10 分钟，小心弃上清。
- 后续处理接上面的革氏阴性细菌提取步骤中的第 2 步。
- 三: 其他注意事项
- 可以直接使用细菌菌落提取 DNA，操作时直接将细菌菌落挑入到溶液 A 中， 后续操作同上。
- 从单个菌落中提取到的 DNA 较少，所以只用 30 μL 通用洗脱液洗脱。
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氧化还原态硫化物（H2 S、S2 O2- 3）或元素硫为硫酸，菌体内无硫颗粒，专性化能自养，主要是硫杆菌属（Thiobacillus）中的一些种，如氧化硫硫杆菌（T.Thiooxidans），排硫硫杆菌（T.thioparus），氧化亚铁硫杆菌（T.ferrooxidans），脱氮硫杆菌（T.denitrificans）等。可进行以下反应： 硫化细菌氧化硫化物获得能量，同化二氧化碳，其中的氧化亚铁硫杆菌，不仅能氧化元素硫和还原态硫化
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