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细胞克隆形成实验(威斯腾生物-中关村生物医学研发检测共享平台

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  • 威斯腾生物拥有“七大基础医学研究平台”和“四大创新研发中心”,是重庆市重点研究中心,承接细胞药筛、动物建模、基因编辑、病理检测、文章编译等服务,已为数千家国内外研发机构与药企提供专业的生物实验技术服务。
  • 2026年01月20日
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      威斯腾生物

    • 服务名称

      细胞克隆形成实验

    一、实验介绍 :
    当单个细胞在体外增殖6代以上,其后代所组成的细胞群体,成为集落或克隆。每个克隆含有50以上的细胞,大小在0.3-1.0mm之间。集落形成率表示细胞的独立生存能力。各种理化因素可能导致细胞的克隆形成能力发生改变。通过一定的实验方法可以对细胞的克隆形成能力进行检测。

    二、实验方法:
    平板集落形成实验、软琼脂集落形成实验
    (a) 平板集落形成实验:本法适用于贴壁生长的细胞和正常培养的细胞
    (b) 软琼脂集落形成实验:本法适用于非锚着依赖性生长的细胞,如骨髓造血干细胞、肿瘤细胞株、转化细胞系。

    三、注意事项:
    (a) 琼脂对热和酸不稳定,若反复加热,容易降解而产生毒性,且硬度下降。因此高压灭菌后应进行分装;
    (b) 细胞在进行克隆形成实验时要求有95%以上的分散度,否则结果的准确度会受到很大影响;
    (c) 软琼脂与细胞混合时温度不能超过40℃,否则将会烫伤/死细胞;
    (d) 接种时细胞密度适度,不可过高。
    细胞在低密度、非贴壁状态条件下培养,生存率明显下降,永生细胞系/株克隆形成率可达到10%以上,但初代培养细胞和有限传代细胞系克隆形成率仅为0.5%-5%,甚至无法形成单个克隆。因此,为了提高克隆形成率,有时需要在培养基中添加胰岛素、地塞米松等促克隆形成物质。
    细胞接种存活率只表示接种细胞后贴壁的细胞数,但贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆。而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。由于细胞生物学性状不同,细胞克隆形成率差别也很大,一般初代培养细胞克隆形成率弱,传代细胞系强;二倍体细胞克隆形成率弱,转化细胞系强;正常细胞克隆形成率弱,肿瘤细胞强。并且克隆形成率与接种密度有一定关系,做克隆形成率测定时,接种细胞一定要分散成单细胞悬液,直接接种在碟皿中,持续一周,随时检查,到细胞形成克隆时终止培养。

    四、服务周期:1-2个月

    实验服务流程
    产品细节图片1

    威斯腾生物服务项目
    分子生物学类 蛋白质与免疫学 动物实验
    实时荧光定量PCR 单克隆抗体制备 帕金森疾病模型
    免疫共沉淀(Co-IP) 多克隆抗体制备 抑郁症动物模型
    ELISA(酶联免疫吸附法)技术 Western-blot 实验服务 脊髓损伤模型
    生化指标检测 蛋白双向电泳实验服务 脑外损伤模型
    双荧光素酶报告基因检测 原核蛋白表达纯化 骨神经损伤模型
    染色质免疫共沉淀(ChIP) 真核蛋白表达纯化 心肌缺血模型
    GST pull Down ITRAQ定量蛋白质组学 心力衰竭模型
      SLAC蛋白组学 肺动脉高血压动物模型
        高血压模型
    病毒类 实验课题整体外包 粥样动脉硬化模型
    过表达/干扰慢病毒包装纯化 整体课题外包 大脑中动脉阻塞模型
    过表达/干扰腺病毒包装纯化 细胞整体实验外包 慢性之气管炎模型
    逆转录病毒包装纯化 动物整体实验外包 过敏性哮喘模型
    腺相关病毒包装纯化   肺炎大鼠模型
        肝炎-肝硬化-肝癌模型
    蛋白芯片 原代细胞培养 肝纤维化模型
    细胞因子芯片 骨髓间充质干细胞培养 胆结石模型
    生长因子芯片 脂肪干细胞培养 急性胰腺炎模型
    信号通路磷酸化水平检测芯片 心肌成纤维细胞培养 急性肾衰竭模型
    BioPlex悬浮芯片 软骨细胞培养 体内血栓模型
    生长因子芯片 血管内皮细胞培养 关节炎模型
    炎症因子芯片 神经元细胞培养 I型和II型糖尿病模型
    血管生成因子芯片 内皮组细胞原代培养 裸鼠成瘤
    凋亡因子芯片   基因编辑动物
    趋化因子芯片 电生理相关服务 动物整体实验服务
    HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 膜片钳实验  
    细胞生物学 高通量测序 代谢组学
    细胞原代培养 mRNA测序 气相色谱GC/MS
    MTT检测 LncRNA测序 液相色谱LC/MS
    细胞凋亡检测 全基因组测序 核磁共震NMR
    细胞周期检测 RNA-Seq测序  
    细胞克隆形成实验 外显子测序 影像学相关实验
    Transwell细胞迁移/侵袭 16s扩增子测序 Micro-CT
    流式分选 Small RNA测序 小动物活体成像
    CCK8/XTT检测 宏基因组测序 核磁共振
    台盼蓝检测细胞活性 单细胞测序 PET-CT
    药物筛选细胞学实验 circleRNA测序  
    细胞粘附性检测 甲基化测序 基因编辑动物
    细胞划痕实验   条件性敲除小鼠/大鼠
    细胞生物学整体实验   全基因敲除小鼠/大鼠
    细胞成管实验    
    病理类 CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 基因芯片
    扫描电镜 基因定点突变细胞系 LncRNA芯片
    透射电镜 单基因敲除细胞系 miRNA芯片
    HE染色 多基因敲除细胞系 mRNA芯片
    免疫组化 目的基因敲入细胞系 甲基化芯片(限人和小鼠来源样本)
    Tunel(原位末端凋亡法)检测 报告基因敲入细胞系 SNP芯片(限人和小鼠来源样本)
    激光共聚焦 miRNA/LncRNA敲除细胞系  
    免疫荧光    
    Masson染色 CRISPR/Cas9动物敲除/敲入 科研方案设计与SCI相关服务
    原位杂交 基因敲除大鼠/小鼠 科研文献论著翻译
    荧光原位杂交 基因敲入大鼠/小鼠 SCI论文翻译润色服务
    特殊染色(PSA、茜素红、阿尔新蓝等)   临床实验/科研实验设计方案指导
    行为学检测 药物筛选服务项目 药效学评价
    水迷宫实验 高通量自动药物筛选平台 神经系统药物药效学评价
    旷场实验 细胞高内涵药物筛选平台 抗肿瘤药物药效学评价
    重复性刻板行为检测 蛋白质组学靶标研发平台 心血管系统药物药效学评价
    动物跑台检测 分子药理研究平台 泌尿系统药物药效学评价
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      常规药物体外筛选 抗炎免疫药物药效学评价

    【本平台合作项目】
    分子生物学、细胞生物学、基因敲出/入、模式动物、SPF动物保种、病理学检测、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务!

     

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      色谱与质谱联合而达到检测大分子物质的目的。   3.代谢组学发展趋势 代谢组学是定量描述生物内源性代谢物对内外因变化应答规律的科学,能够直接反映生命体的终端和表型信息,近年来在疾病诊断和分型、生物标志物发现、药物研发、基因功能解析、代谢途径及调控机理等领域发挥着重要作用。从代谢组学和脂质组学逐年发表的 SCI 文章(图 2)可以看出,代谢组学发展迅猛。 图 2 | 代谢组学在“Web of Science 核心合集”逐年发表的文章统计图 检索日期:2020 年 5 月 3 日,检索关键

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