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- 上海邦景
- BJ-RD074
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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
51
- 英文名：
Oligo(dT) 纤维素
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
25mg
服务流程：
1）Oligo(dT) 纤维素25mg费用客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. Oligo(dT) 纤维素25mg费用在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. Oligo(dT) 纤维素25mg费用组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
RNA 级 CTAB ( 十六烷基基溴化铵 )100g 脂蛋白纯化试剂盒50 次
RNA 级 DEPC ( 焦碳酸 )10mL 脂蛋白 PAGE 染液1套
RNA 级 DTT ( 二硫代苏糖醇 )10g 支气管上皮细胞生长因子5mL
RNA 级 EDTA·2Na ( 四乙酸二 )100g 支气道上皮细胞生长因子5mL
RNA 级 Guanidium HCl ( 盐酸胍 )100g 真细菌种属鉴定 PCR Mix 2100 次
DNA 尿素 -PAGE 上样液1.5mL 噻孢霉素溶液 ,100mg/mL1mL
DNA 尿素 -PAGE 上样液10mL 软骨 RNAout50 次
DNA 非变性 PAGE 上样液1.5mL 乳腺上皮细胞生长因子5mL
DNA 非变性 PAGE 上样液10mL 溶壁酶干粉1g
电泳级 SYBR Green I50μL 人肿瘤细胞分离液 1.055200mL
三合一 RNA 上样液 ( 无 EB) 1.5mL 少突胶质前体细胞生长因子5mL
DNA 碱性胶上样液 ,6×1.5mL 上皮细胞生长因子5mL
DNA 碱性胶上样液 ,6×10mL 上皮细胞生长因子 -25mL
miRNA 尿素 -PAGE 上样液 ,6×1.5mL 三合一 RNA 上样液 ( 无 EB) 1.5mL
miRNA 尿素 -PAGE 上样液 ,6×10mL 三合一 RNA 上样液 ( 含 EB) 1.5mL
阪崎肠杆菌检验培养基 英文名称； 规格；
胰蛋白胨大豆琼脂（TSA） 英文名称； TSA Agar 规格； 250g
阪崎杆菌显色培养基 英文名称； Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium 规格； 1000ml
脑心浸液肉汤 英文名称； Brain Heart Infusion Broth 规格； 250g
改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm） 英文名称； Modified lauryl sulfate tryptose vancomycin medium 规格； 250g
肉汤培养基A Broth medium A(Casein soya bean digest broth) 250g
琼脂培养基B Agar medium B (Casein soya bean digest agar) 250g
琼脂培养基C Agar medium C 250g
肉汤培养基D Broth medium D (Lactose monohydrate broth) 250g
增菌肉汤培养基E Enrichmentbroth medium E 250g
Oligo(dT) 纤维素25mg费用结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA) 用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别用途:用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别。成分(g/L)酵母浸粉 3.0蛋白胨 7.0氯化钠 5.0葡萄糖 10.03号胆盐 1.5结晶紫 0.002中性红 0.03琼脂 12.0pH值7.4 ± 0.1 25℃用法称取本品 39.5g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,煮沸不要超过 2 分钟,冷至 50℃左右时,倾入无菌平皿。无需高压灭菌。
万古霉素0.66mg 添加于200ml卵黄双抗培养基(EPV)或液体双抗增菌液中取一支添加于200ml卵黄双抗培养基(EPV)或液体双抗增菌液中
1%TTC溶液 每支添加于100mlKF链球菌琼脂中每支添加于100ml KF链球菌琼脂中
β-溶血性链球菌
实验步骤：
(1) Oligo(dT) 纤维素25mg费用实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验Synthesis of Radiolabeled, Subtracted cDNA Probes Using Oligo(dT) as a Primer
2. To the chilled microfuge tube, add: 0.1 M dithiothreitol 2.5 μl placental RNase inhibitor 200 units oligo(dT)12-18 10 μl 10x reverse transcriptase buffer 25 μl 20 mM solution of dGTP, dATP, and dTTP 10 μl 125 μM dCTP 10 μl 10 mCi/ml
与rRNA，5SRNA,5.8SRNA和tRNA相比，大多数真核生物的mRNA在其3’端带有poly（A）尾巴，因此mRNA能用oligo（dT）-纤维素亲和层析法从细胞总RNA中分离。本文中介绍的方法是利用带有poly（A）尾巴的mRNA能与连在纤维素介质上的短链oligo（dT）形成稳定的RNA-DNA杂合链的原理。poly（A）+RNA能用oligo（dT）层析柱选择洗脱，也能分批洗脱，即批量层析的方法。详情请查看下列pdf文件：“oligo（dT）-纤维素层析法提取po
Selection of Poly(A)+ RNA by Oligo(dT)-Cellulose Chromatography Joseph Sambrook Peter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, Australia David W
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