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- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
43
- 英文名：
RNase-free DTT 溶液 ,1M
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10mL
1）RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL说明书客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
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储存事项:
A. RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL说明书在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL说明书组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤：
(1) RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL说明书实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
磁珠法 mRNA 提取试剂盒25 次 柱式动物 RNAout50 次
Oligo(dT) 纤维素25mg 柱式动物 RNA-DNA 双提试剂盒50 次
Oligo(dT) 再生溶液100mL 柱式动物 DNAout50 次
链霉亲和素磁珠2mL 柱式凋亡 DNAout50 次
固相 RNase 清除剂100mL 柱式病毒 RNAout50 次
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 3.09 mL
天净沙非同位素探针杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 3.01 mL
DAB 法生物素杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 2.0 9 mL
TMB 法生物素杂交试剂盒5次 即用型 PCR 试剂盒 2.0 1 mL
ECL 法生物素杂交检测试剂盒5次 环状 DNA 全基因组扩增试剂盒30 次
骨骼肌细胞生长因子5mL Fluo-3AM( 钙离子荧光探针 )250μL
黑色素细胞生长因子5mL Fluo-3，五铵盐1mg
黑色素细胞生长因子 - 不含 TPA5mL Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
滑膜细胞生长因子5mL ER-Tracker Red( 内质网红色荧光探针 )20μL
间充质干细胞成骨细胞分化生长因子5mL EHA105 农杆菌感受态细胞10×100μL
氯化钠血琼脂基础 英文名称； Sodium Chloride Blood Agar Base 规格； 250g
霍乱双糖铁琼脂(KIA) 英文名称； KIA 规格； 250g
T1N1琼脂 英文名称； T1N1 Agar 规格； 250g
T1N0肉汤 英文名称； TIN0 Broth 规格； 250g
T1N3肉汤 英文名称； T1N3 Broth 规格； 250g
麦芽浸膏琼脂 Malt Extract Agar 200g
皮肤癣菌鉴别琼脂（DTM） DTM Agar 250g
马铃薯-蔗糖培养基 Potato sucrose Medium 250g
无机盐琼脂培养基 Inorganic Agar 250g
矿物盐琼脂 Mineral Salts Agar 250g
RNase-free DTT 溶液 ,1M10mL说明书瓷珠菌种保存管（20支） 用于菌种保存（瓷珠法）瓷珠菌种保存管由冷冻管、瓷珠和冷冻保存液组成，主要用于菌种保存、复苏和运输。相对于传统的菌种保藏方法具有明显的优势：1、操作简单方便：挑取细菌新鲜纯培养物，接入菌种保存管。2、菌种保存快速：内含天然的多孔瓷珠，有利于细菌的吸附及保存。冷冻保存液使菌株免受溶液和冰晶影响。混匀后，吸出冷冻保存液。3、包装物体积小：1.8ml冷冻管。4、菌种保存时间长：特殊材料制成的冷冻管，密封性能及耐低温性能极好。2-8℃可保存6个月；-20℃可保存12个月；-80℃可保存24个月。
Amies运送培养基管 用于致病菌标本的运送保存用于致病菌标本的运送保存
Stuart运送培养基管 用于致病菌标本的运送保存用于致病菌标本的运送保存
Cary-Blair氏运送培养基管 用于运送肠道致病菌标本用于运送肠道致病菌标本
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文献和实验，而同样情况下HPRI只能抑制50 % 的活性。完全不需要加入DTT以维持最高活性。在更宽的pH值范围，更宽的 DTT 浓度范围和温度范围保持稳定可用于非变性条件的 RNA 纯化过程，例如可用于带有 1%Nonidet 溶液的 RNA 抽提试剂，或者是单细胞 RNA 纯化和 RT-PCR在变性条件下不会释放出已经结合的RNase。实际上在没有DTT的条件下 Prime RNase Inhibitor 的活性更高，而在2 0mM DTT 下 Prime RNase Inhibitor 仍然有90
分装。DTT和巯基乙醇相比，作用相似，但DTT的刺激性气味要小很多，毒性也比巯基乙醇低很多。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时，两者效果相近。但DTT价格略高一些。DTT粉末的一般保存条件：-20℃保存。1M DTT溶液可以在-20℃保存2年以上。 由于容易被空气氧化，因此DTT的稳定性较差;但冷冻保存或在惰性气体中处理能够延长它的使用寿命。由于质子化的硫的亲核性较低，随着pH值的降低，DTT的有效还原性也随之降低;而Tris(2-carboxyethyl)phosphine HCl(TCEP
过的水配制，那么在药品称量、调pH值等过程中tris缓冲液会造到RNase的再次污染，所以是一个两难的境地。但是今天我要谈的是RNase并不顽固，高压灭菌可以去除其大量活性。 下面的实验照片（照片来自ambion）很清楚的显示了高压灭菌的效果。实验很简单，将不同含量的RNase用高压灭菌处理，然后与未高压灭菌处理的RNase一起来降解RNA（37度1小时），结果表明，当RNase的污染量小于100ng/ml时，高压灭菌可以去除其活性。这张照片还说明了一个问题，当你的RNA溶液中含有
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