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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
36
- 英文名:
DEPC 水
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100mL
1)DEPC 水100mL品牌客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作日
以下是DEPC 水100mL品牌的详细介绍点击了解更多RNA纯化产品:

储存事项:
A. DEPC 水100mL品牌在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项:
1. DEPC 水100mL品牌组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
实验步骤:
(1) DEPC 水100mL品牌实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
白细胞裂解液100mL 抑氨肽酶,5mg/mL5mL
微型离心管专用研磨杵 ( 无离心管 ) 50 只 遗传霉素 (G418) 干粉100mg
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专用离心管 ( 配研磨杵用 ) 1000 只 衣霉素溶液 ,5mg/mL1mL
超快核酸转膜试剂盒5次 酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )1.5mL
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即用型荧光定量 PCR 试剂盒600 次 非冻型拭子 DNA 保存液 A( 无拭子 ) 100mL
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ROX 参考染料 II100μL 非变性法蛋白沉淀试剂盒10 次
志贺氏菌增菌肉汤 英文名称; Shigiella Broth 规格; 250g
志贺氏菌显色培养基 英文名称; 规格; 1000ml
柯氏尿素琼脂 英文名称; 规格; 250g
MLCB寒天培地 英文名称; MLCB Agar 规格; 250g
GN增菌液(10ml) 英文名称; 规格; 10ml*20
脑心浸液琼脂(BHIA) Brain Heart infusion Agar 250g
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂) Pfizer Enterococcus Selective Agar 250g
6.5%NaCl葡萄糖琼脂 6.5% NaCl Dextrose Agar 250g
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乙基紫叠氮钠肉汤(litsky肉汤) 250g
DEPC 水100mL品牌多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基 用于产气荚膜梭菌的培养(SN标准)用途:用于产气荚膜梭菌糖(醇)发酵的基础培养基。成分(g/L)多价胨 20.0酵母膏 5.0氯化钠 5.0pH值6.9 ± 0.1 25℃用法称取本品 30.0g,并加入 10g糖或醇,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装到螺帽试管内,每管 9ml,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
疱肉培养基基础 加入牛肉粒,用于肉毒梭菌及厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB标准)用途:用于厌氧菌的增菌培养。成分(g/L)蛋白胨 30.0牛肉浸粉 3.0酵母浸粉 5.0可溶性淀粉 2.0葡萄糖 3.0磷酸二氢钠 5.0pH值7.0 - 7.4 25℃用法称取本品 48.0g,加入 1000ml蒸馏水,加热溶解并不停搅拌,煮沸 1 分钟。取碎肉渣分装 15mm×150mm 试管约 2-3cm高,将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约 1cm。121℃高压灭菌 15 分钟备用。质量控制和典型特征36±1℃培养 24-72 小时,待出现生长特征(培养液浑浊、产气、出现异味)后进行镜检和接种到分离培养基中(如铁琼脂)。反之,则报告阴性。
疱肉牛肉粒 加入疱肉基础中,配成疱肉培养基加入疱肉基础中,配成疱肉培养基
液体硫乙醇酸盐培养基 用于产气荚膜梭菌确证试验的细菌培养(GB.SN标准)用途:用于药品、生物制品无菌检测,检测好氧菌和厌氧菌。成分(g/L)酪胨(胰酶水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸钠 0.5L-胱氨酸 0.5氯化钠 2.5刃天青 0.001琼脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃用法称取本品 29.25g,加热搅拌溶解于 1000ml 纯化水中,分装适宜容器 ,其装量与容器高度的比例应符合,培养结束后培养基氧化层 ( 粉红色 ) 不超过培养基深度的 1/2 。121℃高压灭菌 15 分钟迅速冷却。在供试品接种前,培养基氧化层高度不得超过培养基深度的 1/5 。否则,须经100℃水浴加热至粉红色消失( 不得超过 20 分钟 ),迅速冷却 ,只限加热一次,并应防止被污染。
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文献和实验Procurement 100ml DEPC from Sigma (D5758) [1] - �33/$292 (as of 2009-01) 100ml DEPC from MPI (150902) [2] - �13 (as of 2009-01) DEPC-treatment of solutions add 0.05-0.1% (v/v) DEPC to solution/water (More DEPC
DEPC有致癌性,不能处理Tris溶液等这些事项大家都知道,所以不谈。谈一些实验室中的操作误区。 误区一:重复使用含DEPC的水处理枪头、离心管等。由于DEPC较贵,而且书上说DEPC要用高压灭菌处理去除,于是有些人就萌发了重复使用DEPC的想法,即对含有DEPC的水不进行高压灭菌,从而重复使用含DEPC的水处理枪头、离心管等。节约本是好事,但这样的节约是无效的。为什么不能重复使用含DEPC的水,因为DEPC在水溶液中不稳定,极易分解,DEPC在pH6.0和pH7.0的PBS
它替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头,效果不错;后来又用于处理 RNase-Free的水,效果也是一级棒。从此就再也不用 DEPC 了。现在将它的细节公开,与大家分享。 配制 RNA 裂解试剂时,直接用灭菌的双蒸水配制,最后,加入蛋白酶 K 至终浓度 1ug/ml。轻轻混匀,室温放置 15 分钟后即可。 枪头及离心管去除 RNase:先将枪头及离心管清洗干净后,移入预先混好的含 1ug/ml 蛋白酶 K 的双蒸水,彻底浸入。室温放置 30 分钟后,连水一起高压灭菌。弃水
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