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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
20
- 英文名：
一步法质粒 DNAout 2.0
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
100 次
服务流程：
1）一步法质粒 DNAout 2.0100 次规格客户提供材料
2）提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
客户提供：
新鲜材料或正确保存条件下材料（组织、细胞、细菌等）
4℃保存一周，-20℃保存一个月，-80℃保存一年血液样品（EDTA，肝素，柠檬酸钠抗凝）
详细的背景资料：来源、特点、类型等
我们提供：基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证：高纯度RNA/DNA、完整货期：3-5个工作日
储存事项:
A. 一步法质粒 DNAout 2.0100 次规格在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打，颠倒混匀，充分溶解RNase A和DNase I后，按照每次使用量分装－20℃冻存，有效期6个月。
B. 结合液LB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
C. 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
注意事项：
1. 一步法质粒 DNAout 2.0100 次规格组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-2R ELISA Kit
大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA检测试剂盒RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 96T/48T
人em样转录因子1(EML1)免疫试剂盒 Human EML1 ELISA Kit
英文名称Mouse-3ELISAKit小鼠神经营养素3(-3)规格：96T/48T
THROMBIN清除处理试剂盒10次
RabbitmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/RLAⅠELISA试剂盒兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA试剂盒规格：96T/48T
猪圆环病毒2型抗体ELISA检测试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
People four arachidonic acid (AA) ELISA Kit 人花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒
RabbitPlateletFactor4,PF-4ELISAKit 兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforAPC(HumanactivatedproteinC)ELISAKit人活化蛋白C规格：48T/96T
血清脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量检测试剂盒20次
Porcineierleukin3,IL-3ELISAKit猪白介素3(IL-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
总RNA提取试剂盒(RNApure+仿) Total RNA Exaction Kit (RNApure+ )
细菌/总RNA提取试剂盒 Bacterial / total RNA Exaction Kit
动物组织/细胞总RNA提取试剂盒 Animal tissue / cell total RNA Exaction Kit
植物总RNA提取试剂盒 Pla total RNA Exaction Kit
BPL琼脂250g用于食品中沙门氏菌选择性分离培养
麦康凯肌醇阿东醇羧卞青霉素琼脂(MZAC) 250g 用于食品中克雷伯氏菌分离培养
哥伦比亚血琼脂基础 Columbia Blood Agar Base 250 营养非常丰富，用各种细菌的基础培养基(AFNOR EP IDF标准)
氯胰蛋白胨稀释液250g/瓶用于样品的制备与稀释(SN)incubationmedia氯胰蛋白胨稀释液250g/瓶用于样品的制备与稀释(SN)
PlateCountAgar
甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板（MYP） 规格： 90mmX20个 用途： 用于蜡样芽孢杆菌的菌数测定及分离培养(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和...
血平板 规格： 90mm×20个 用途： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－2010，GB/T4789.37－2008 ，GB 4789.30－2...
甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础MYP 规格： 250g 用途： 用于蜡样芽孢杆菌的菌数测定及
一步法质粒 DNAout 2.0100 次规格氧化胺培养基250g用于分解
50010 琼脂粉 BR 250 g 培养基凝固剂 incubation media 50010 琼脂粉 BR 250 g 培养基凝固剂
酮丛毛单胞菌 反硝化细菌 支/瓶
LBBroth(Miller)
YPDAMedium
实验步骤：
(1) 一步法质粒 DNAout 2.0100 次规格实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:(25:24:1)抽提两次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
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文献和实验同其他昆虫传播的疾病一样，首先应对昆虫等中间或储存宿主加以控制和消灭，如灭鼠、灭虱。5、立克次氏体病病因病理近年来，随着立克次氏体分子生物学（16srRNA序列、DNA-DNA杂交、全DNA或基因片段、质粒等）研究的进展，旧的立克次体分类已不能完全反映立克次目中所有种属的全貌，应运而生的是根据遗传物质对立克次体进行新的分类。16srRNA序列的分析显示，立克次体可分为两个亚群，α亚群包括立克次体（Rickettsia）、埃立克体（Ehrlichia）、埃菲比体（Afibia）、考德里体（Cowdria
理想。 我一共做过四五个重组质粒，其中插入片段，大的有2000bp左右的，小的也有200bp左右的。其中200bp~900bp的不大不小的片段相对好做，2000bp的难度相对较大。而其中最难做的恐怕就是ShRNA表达质粒了，RNAi技术这些年是一个热点，但是把一个只有63bp的小片断DNA插入到4000bp~5000bp的质粒DNA当中，并不是一件容易的事情。期间我们做了近百次的尝试，总结出这么一些经验： 1、质粒酶切方式的选择。现在看来，如果质粒的条件允许，最好选择双酶切。因为双酶切操作相对简单
mmol/L Tris HCl（pH8.0）10 mmol/L EDTA（pH8.0）Tips：这一步主要作用是重悬菌体，EDTA 是金属螯合剂，主要作用是防止下一步的裂解过程中内切酶对质粒进行切割。4. 加入 200ul 新配置的溶液 II，盖紧管口，快速颠倒离心管 5 次，切勿震荡，将离心管置于冰上。溶液 Ⅱ0.2 mol/L NaOH（临用前用 10 mol/L 贮存液现用现稀释）1% SDS Tips：菌体在强碱性条件下裂解，释放出包括质粒在内的核酸，蛋白等物质。注意混匀要轻柔
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