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22
- 英文名:
MEM maintenance of fluid
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
36支/盒
产品名称:MEM维持液费用
英文名称:MEM maintenance of fluid
产品规格:36支/盒
产品用途:用于病毒的运送用于病毒的运送
| 产品名称 | 英文名称 | 价格 |
| MEM维持液费用 | MEM maintenance of fluid | 来电可享受优惠 |
【实验方法】
MEM维持液费用1.培养基阳性组:取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中,每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中,用于计数,每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组:即空白对照,即不添加菌液。
3. 接种量计数:步骤1中的平皿中,细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基,霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4.培养条件:
无菌检查:20~25℃培养14天或直至出现浑浊(不超过14天)
MPN计数:30~35℃培养箱中培养3天
控制菌检查:30~35℃培养箱中培养18~24小时
倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30~35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20~25℃培养箱中培养3~5天
培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
MEM维持液费用(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
用于微生物分离,鉴定,计数。如图,微生物分离成菌落、菌苔。图中为大肠杆菌菌落,是用涂布平板法得到。
用于分离微生物的固体培养基
用于分离微生物的固体培养基
(2)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
用于观察微生物运动特征。如图,左侧试管中微生物不运动,而右侧试管中微生物运动,因而两试管中现象不同
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
(3)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业。
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注意事项:
◆MEM维持液费用标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。保存过久可发生聚合在ELISA中可使本底加深。
◆冻结标本溶解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混合,不要在混匀器上强烈震荡。
◆浑浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
◆反复冻融会使蛋白效价降低,所以代测样本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。ELISA实验标准曲线平直,一般有以下原因:标准曲线制备是否不当,洗孔不净,吸孔不充分,读数不准确或是吸量误差。查找原因,即可找到相应解决方案。
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文献和实验oC,CO2烘箱培养1h,其中每隔15min,需要将种毒瓶和对照瓶拿出,轻轻摇晃瓶子,保证病毒液或维持液能在细胞面上来回20-30次,使病毒液或维持液能充分接触细胞; 7.1h后,在晃动瓶子4次后,重新进入无菌间,在培养瓶中加入维持液; ①. 维持液配方一: MEM 2鸖 3%谷氨酰胺 1%双抗 NaHCO3(其用量以调节pH至7.0为准,浓度为6%); ②. 维持液配方二: MEM 3%谷氨酰胺 1%双抗 NaHCO3(其用量以调节pH至7.0为准,浓度为6%); ③
病毒液或维持液能在细胞面上来回20-30次,使病毒液或维持液能充分接触细胞; 7.1h后,在晃动瓶子4次后,重新进入无菌间,在培养瓶中加入维持液; ① 维持液配方一 MEM 2鸖 3%谷氨酰胺 1%双抗 NaHCO3(其用量以调节pH至7.0为准,浓度为6%); ② 维持液配方二 MEM 3%谷氨酰胺 1%双抗 NaHCO3(其用量以调节pH至7.0为准,浓度为6%); ③ 一般还是使用有FBS的维持液,因为对细胞有一定的保护作用; 8. 将加完维持液的培养瓶放回37℃
传统的空斑实验方法测呼吸道合胞病毒的PFU值,由于其空斑形成较小,且需要借助特异性的表面融合蛋白抗体来确定,故操作繁琐,费用较高。这里介绍给大家三种简单易行的空斑形成实验操作方法:方法一1、以5×10e5/ml的密度接种Hep-2细胞到6孔板中,每孔加入3ml细胞悬液;2、待细胞长成单层后(不得超过48hr),移去营养液,每孔加入400ul的PBS和100ul毒液(10倍系列稀释);3、37℃,5%CO2,吸附1-4h,每隔15-30分钟应摇晃板子1次以令病毒分布均匀,病毒在4h时达到最高吸附
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