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一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次品牌

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  • 上海邦景
  • BJ-RD292
  • 进口、国产
  • 2025年07月14日
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    • 英文名

      一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )

    • 保质期

      详见说明书

    • 供应商

      上海邦景

    • 保存条件

      低温冷藏

    • 规格

      1次

    实验要点:
    1CTAB 溶液在低于15时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。  
    2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。 
    3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS DH5α菌种接种在LB 固体培养基(50μg/ml Amp), 37培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(50μg/ml Amp),37振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
    点击了解更多DNA纯化产品:
    一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次品牌详细介绍:
    产品细节图片1
    公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
    1RNA纯化系列产品
    2DNA纯化系列产品
    3、电泳及回收系列产品
    4、探针标记及检测系列产品
    5、核酸扩增系列产品
    6、克隆表达系列产品
    7、基因组研究系列产品
    8、蛋白质研究系列产品
    9、细胞生物学研究系列产品
    10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
    以下是一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次品牌的相关产品:
    小鼠白介素2受体β(IL2Rβ)ELISA试剂盒 ,英文名: IL2Rβ ELISA Kit

    人嗜环蛋白/亲环素B(CyPB)ELISA检测试剂盒HumancyclophilinB,CyPBELISAKit 96T/48T
    大鼠抗环胍氨酸肽抗体(Ai-CCP-aibody)免疫试剂盒 Rat Ai-Cyclic Ciullinated Peptide Aibody(Ai-CCP-aibody)ELISA Kit
    英文名称RatC4aELISAKit大鼠补体片断C4a(C4a)规格:96T/48T
    酒类三醇比色法定量检测试剂盒20
    人癌标志物-CA153ELISAKit人癌标志物-CA153ELISAKit48T/96T人癌标志物-CA153ELISAKit48T/96T规格:48T/96T
    猪孕酮(PROG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
    Human erythrocyte membrane protein (EMP) ELISA Kit 人红细胞膜蛋白(EMP)ELISA试剂盒
    RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit 兔子补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
    CLIAKitforAPF(Humanai-perinuclearfactor)ELISAKit人抗核周因子抗体规格:48T/96T
    血清钙比色法定量检测试剂盒50
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    LM-250g用于滤膜法单增李氏菌选择性分离(NEOGEN标准)
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    SS琼脂 Salmonella Shigella Agar 250 沙门氏菌属和志贺氏菌属的分离培养
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    biochemicalidentificationofsetsoftubes
    庖肉培养基基础  规格:  250g  用途:  用于厌氧菌的增菌培养和保存,还用于肉毒梭菌及兼性厌氧和厌氧梭状芽孢杆菌的检验(GB/T 8538-200...
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    纳氏试剂  规格:  10ml/  用途:  用于绿脓杆菌分解乙酰胺产试验。
    氧化酶试纸  规格:  10/  用途:  用于氧化酶试验。
    一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次品牌AKAgar(No.2)
    Fraser肉汤基础 Fraser肉汤添加物合用选择增强与鉴定李斯特菌 500g incubation media Fraser肉汤基础 Fraser肉汤添加物合用选择增强与鉴定李斯特菌 500g
    扁柄侧耳 食用 /
    LBth
    YeastPeptoneDextroseAgar
    操作步骤:
    1. 一步法 96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅
    b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(3.5cm直径的培养板)1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNADNA污染。
    c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
    2.将匀浆样品在室温(15-30)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
    3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-810000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
    5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
    6. 2-810000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅
    7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
    8. 2-810000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。

     

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    图标文献和实验
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    • 采用Ostro 96孔样品制备板轻松提高DBS萃取物的洁净程度

      %以上的PLs残留。Ostro 96孔板可通过使用96孔制备板的形式进一步简化DBS萃取流程,同时提取分析物、去除磷脂、过滤干血斑纸片。DBS样品可在孔内萃取并稀释直接进样到LC/MS/MS系统中。该创新方法能够显著降低样品制备时间,并在萃取转化、干燥、复溶过程中避免潜在的分析物流失。在本应用纪要中,我们同时应用了传统方法和Ostro 96孔样品制备板方法,对含有利培酮、利培酮羟基化代谢物、9-OH利培酮及其内标氯氮平(图1)的全血样品进行了萃取。 实验部分

    • 质粒DNA纯化

      试验原理:大量提取的质粒DNA一般需进一步纯化,常用柱层析法和氯化铯梯度离心法。常使用的所有纯化方法都利用了质粒DNA 相对较小及共价闭合环状这样两个性质。例如,用氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心分离质粒和染色体DNA 就取决于溴化乙锭与线状以及与闭环DNA分子的结合量有所不同。 溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合,进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加,作为补偿,将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后,超螺旋度大为增加, 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限

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      。7)用合适转头于室温以500转/分离心15分钟,回收核酸。如于4℃离心,盐也会了生沉淀。8)小心倒掉上清,敞开瓶口倒置离心瓶使残余上清液流尽,于室温用70%乙醇洗涤沉积管壁。倒出乙醇,用与真空装置相联的巴期德吸出附于瓶壁的所有液滴,于室温将瓶倒置放在纸巾上,使最后残余的痕量乙醇挥殆尽。9)用3ml TE(pH8.0)溶解核酸沉淀。10)纯化。四、质粒DNA的纯化聚乙二醇沉淀法质粒DNA氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA(一)聚乙二醇沉淀法提取质粒DNA1)将核酸溶液所得]转入15mlCorex

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