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柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-P

CR荧光探针法)
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  • ¥2000 - 3000
  • xuanya
  • 中国/美国
  • XY-EP-R-1181
  • 2026年01月14日
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      -20℃

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      Coxsackievirus CA16 (CAV-16) nucleic acid detection kit (RT-PCR fluorescent probe method)

    • 库存

      850

    • 供应商

      上海烜雅生物科技有限公司

    • 规格

      48T/50T

    【产品名称】
    通用名称:柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)
    【包装规格】48T/盒
    Name :Coxsackievirus CA16 (CAV-16) nucleic acid detection kit (RT-PCR fluorescent probe method)
    柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【检验原理】
    本试剂盒采对指标基因设计特异性的引物和探针,用荧光 PCR 技术对指标的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
    柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【预期用途】
    本试剂盒适用于检测动物腺、肝、脾、肺组织及人痰、血液等标本中分离出的指标,用于指标的定量检测辅助诊断。

    【试剂组成】
    名 称 规 格
    核酸提取液 1.5mL×2 管
    酶液 50μL×1 管
    反应液 1.0mL×1 管
    阳性质控品 50μL×1 管
    阴性质控品 250μL×1 管
    说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。

    柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【保存和运输】
    上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本
    运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
    组织样品:称取组织样品约 0.5g,置于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,匀浆后取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;
    痰、尿液等液体样品:取 100μL 于灭菌离心管中;
    血液样品:取抗凝血下层血细胞 50μL,加入 100μL 双蒸水吹匀。
    DNA 提取
    对上述处理好的标本加入 50μL 核酸提取液,100℃恒温处理 10min,13,000
    rpm 离心 5min,取上清液转移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;
    DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂盒
    (离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。

    柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【使用方法】
    样品处理(样本处理区)
    样本前处理
    组织样品:每份组织分别从 3 个不同的位置称取样品约 1g,手术剪剪碎混匀后取0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中,8000rpm 离心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;棉拭子取 100μL 进行提取。
    【标本采集】
     病死或扑杀猪,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;生猪灭菌
    棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中
    【标本采集】
     病死或扑杀猪,取分泌物、血液、脾脏、扁桃体、肾脏和淋巴结等

    试剂配制(试剂准备区)
    根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;样品每满 7 份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:
    试剂 反应液 酶液
    用量(样本数为 N) 20μL 1μL
    将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中,21uL/管。
    加样(样本处理区)
    将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。
    PCR 扩增(核酸扩增区)
    将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;
    设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25μL;
    荧光通道选择: 检测通道(Reporter Dye)FAM, 淬灭通道(Quencher Dye)
    NONE,请勿选择 ROX 参比荧光。

    质控标准
    阴性质控品:无明显扩增曲线或无 Ct 值显示;
    阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
    柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【参考文献】
    国家质量监督检验检疫总局.SN/T 1280-2003 国境口岸鼠疫检验规程[S].北京:科学出版社, 2003.
    张志凯, 海荣, 蔡虹, 等. 鼠疫耶尔森菌的多重 PCR 检测方法[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2007.
    吉林省质量技术监督局. DB22/T 2081-2014 鼠疫耶尔森菌核酸的测定-荧光PCR 方法[S].

    推荐循环参数设置:
    步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号
    1 1 cycle 95℃ 10min
    2 40 cycles 94℃ 15sec
    55℃ 30sec
    结果分析判定
    结果分析条件设定
    设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。

    结果判断
    阳性:检测通道 Ct 值≤35.0,且曲线有明显的指数增长曲线。
    可疑:检测通道 Ct 值>35.0,且出现明显扩增曲线的样本建议重复试验,重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和明显扩增曲线者为阳性,否则为阴性。
    阴性:样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。
     
    柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【储存条件及有效期】
    -20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。
    【适用仪器】
    ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
    【标本采集】
    患病动物:腺、肝、脾、肺组织、粪便、血液人:痰;尿液、血液
    【保存和运输】
    上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
    【产品图片】
    产品细节图片1 
     
    【生产企业】
    企业名称:上海烜雅生物科技有限公司
    生产地址:金海公路3265号14幢11546室 
     
    上海烜雅生物科技有限公司生产的柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)供应质量高,价格低,售后有保证。为您的实验保驾护航。
      
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    本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断。
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