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- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Coxsackievirus CA16 (CAV-16) nucleic acid detection kit (RT-PCR fluorescent probe method)
- 库存:
850
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 规格:
48T/50T
通用名称:柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)
【包装规格】48T/盒
Name :Coxsackievirus CA16 (CAV-16) nucleic acid detection kit (RT-PCR fluorescent probe method)
柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【检验原理】
本试剂盒采对指标基因设计特异性的引物和探针,用荧光 PCR 技术对指标的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【预期用途】
本试剂盒适用于检测动物腺、肝、脾、肺组织及人痰、血液等标本中分离出的指标,用于指标的定量检测辅助诊断。
【试剂组成】
| 名 称 | 规 格 |
| 核酸提取液 | 1.5mL×2 管 |
| 酶液 | 50μL×1 管 |
| 反应液 | 1.0mL×1 管 |
| 阳性质控品 | 50μL×1 管 |
| 阴性质控品 | 250μL×1 管 |
柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本
运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
组织样品:称取组织样品约 0.5g,置于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,匀浆后取 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;
痰、尿液等液体样品:取 100μL 于灭菌离心管中;
血液样品:取抗凝血下层血细胞 50μL,加入 100μL 双蒸水吹匀。
DNA 提取
对上述处理好的标本加入 50μL 核酸提取液,100℃恒温处理 10min,13,000
rpm 离心 5min,取上清液转移至新的 1.5mL EP 管,-20℃保存;
DNA 的提取也可以采用上海烜雅生物科技有限公司生产的 DNA 提取试剂盒
(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。
柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【使用方法】
样品处理(样本处理区)
样本前处理
组织样品:每份组织分别从 3 个不同的位置称取样品约 1g,手术剪剪碎混匀后取0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中,8000rpm 离心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;棉拭子取 100μL 进行提取。
【标本采集】
病死或扑杀猪,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;生猪灭菌
棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中
【标本采集】
病死或扑杀猪,取分泌物、血液、脾脏、扁桃体、肾脏和淋巴结等
试剂配制(试剂准备区)
根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;样品每满 7 份,多配制 1 份),每测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 反应液 | 酶液 |
| 用量(样本数为 N) | 20μL | 1μL |
加样(样本处理区)
将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。
PCR 扩增(核酸扩增区)
将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;
设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25μL;
荧光通道选择: 检测通道(Reporter Dye)FAM, 淬灭通道(Quencher Dye)
NONE,请勿选择 ROX 参比荧光。
质控标准
阴性质控品:无明显扩增曲线或无 Ct 值显示;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。
柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【参考文献】
国家质量监督检验检疫总局.SN/T 1280-2003 国境口岸鼠疫检验规程[S].北京:科学出版社, 2003.
张志凯, 海荣, 蔡虹, 等. 鼠疫耶尔森菌的多重 PCR 检测方法[J]. 中国媒介生物学及控制杂志, 2007.
吉林省质量技术监督局. DB22/T 2081-2014 鼠疫耶尔森菌核酸的测定-荧光PCR 方法[S].
推荐循环参数设置:
| 步骤 | 循环数 | 温度 | 时间 | 收集荧光信号 |
| 1 | 1 cycle | 95℃ | 10min | 否 |
| 2 | 40 cycles | 94℃ | 15sec | 否 |
| 55℃ | 30sec | 是 |
结果分析条件设定
设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。
结果判断
阳性:检测通道 Ct 值≤35.0,且曲线有明显的指数增长曲线。
可疑:检测通道 Ct 值>35.0,且出现明显扩增曲线的样本建议重复试验,重复试验结果出现 Ct 值≤35.0 和明显扩增曲线者为阳性,否则为阴性。
阴性:样本检测结果无 Ct 值且无明显的扩增曲线。
柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)【储存条件及有效期】
-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。
【适用仪器】
ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
【标本采集】
患病动物:腺、肝、脾、肺组织、粪便、血液人:痰;尿液、血液
【保存和运输】
上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
【产品图片】
【生产企业】
企业名称:上海烜雅生物科技有限公司
生产地址:金海公路3265号14幢11546室
上海烜雅生物科技有限公司生产的柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)供应质量高,价格低,售后有保证。为您的实验保驾护航。
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本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断。
柯萨奇病毒CA16型(CAV-16)核酸检测试剂盒(RT-PCR荧光探针法)热销产品:
| 一站式 PCR-SSCP 套装 | XY-TE-0010 | 1套 |
| 甲酰胺,PCR 级 | XY-TE-0074 | 5mL |
| PCR 优化试剂盒 | XY-TE-0078 | 1套 |
| 甲基化专一性 PCR 试剂盒 | XY-TE-0119 | 50 次 |
| RAPD PCR 试剂盒 ( 含银染 ) | XY-TE-0142 | 100 次 |
| 即用型易错 PCR 试剂盒 | XY-TE-0143 | 100 次 |
| 即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒 | XY-TE-0185 | 300 次 |
| 即用型荧光定量 RT-PCR 试剂盒 | XY-TE-0186 | 50 次 |
| 即用型 PCR 检测试剂盒系列 | XY-TE-0193 | 50T |
| DOP-PCR 试剂盒 | XY-TE-0204 | 50 次 |
| PCR 专用 LIC 克隆套装 | XY-TE-0231 | 1μg |
| MnCl2溶液,25mM,PCR 级 | XY-TE-0493 | 5mL |
| 克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成试剂盒 | XY-TE-0497 | 10 次 |
| 克必隆 eTS 超敏 PCR 法 cDNA 合成试剂盒 | XY-TE-0498 | 10 次 |
| 克必隆 eTS 抑制性差减杂交 PCR 试剂盒 | XY-TE-0501 | 10 次 |
| 克必隆 eTS PCR 产物差减杂交试剂盒 | XY-TE-0502 | 1套 |
| 克必隆 eTS miRNA RT-PCR 试剂盒 | XY-TE-0508 | 10 次 |
| 天净沙甲基化 PCR 2.0 试剂盒 | XY-TE-0523 | 150 次 |
| 海藻糖溶液,1.5M,PCR 级 | XY-TE-0532 | 1.5mL |
| 即用型多重 PCR 试剂盒 | XY-TE-0632 | 50 次 |
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- 内容
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文献和实验感染脑膜、肌肉和粘膜等部位。人体受感染后,约60%呈隐性感染。出现临床症状时,由于侵犯的器官组织不同而表现各异(表25-1)。 表25-1 柯萨奇病毒、埃可病毒、新型肠道病毒引起的临床综合症及相关的病毒血清型 临床综合症 柯萨奇病毒 埃可病毒及新型肠道病毒(E) A组 B组 无菌性脑膜炎 2,4,7,9,10. 1,2,3,4,5. 4,6,9,11,16,30;E70,E71. 肌无力和麻痹 7,9. 2,3,4,5. 2,4,6,9,11,30;E71. 皮疹、粘膜
佚名 柯萨奇病毒、埃可病毒及新型肠道病毒分布广泛。依病毒亚群和血清型的不同或对不同组织的嗜性不同(受体的差异),可引起各种不同的疾病。 一、病毒型别与抗原性 (一)柯萨奇病毒 柯萨奇病毒对乳鼠的敏感性很高,根据它们感染乳鼠产生的病灶,柯萨奇病毒可以分为A、B两组。A组有23型病毒,B组有6型病毒。通过型特异性抗原,经中和
以 100~400nt 为宜,过长则杂交效率减低。最近研究结果表明,寡核苷酸探针(16~30nt)能自由出入细菌和组织细胞壁,杂交效率明显高于长探针。因此,寡核苷酸探针和不对称 PCR 标记的小 DNA 探针或体外转录标记的 RNA 探针是组织原位杂交的优选探针。二、液相杂交所参加反应的两条核酸链都游离在溶液中,一种研究最早且操作复合的杂交类型,在过去的 30 年里虽有时被应用,但总不如固相杂交那样普遍。主要缺点是杂交后过量的未杂交探针在溶液中除去较为困难和误差较高。近几年由于杂交检测技术的不断
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