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- 钰博生物
- YB-11-648
- 中国/美国
- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
甲型流感病毒 H1N1 2009 型（IAV-H1N1 2009）核酸检测试剂盒(RT-PCR法)
- 保质期：
保存期限一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次/盒
1. 即开即用，用户只需要提供病毒 RNA 模板。
2. 两管式 RT-PCR，一次 RT 反应产物可以作为多次 PCR 的模板。本试剂盒提供 10 次的 RT 反应试剂和 50 次的 PCR 试剂。
3. 引物经过优化，特异性高，引物是根据基因的保守区域设计，适用于所有强、中、弱新城疫毒株，产物长度为 421 bp。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
甲型流感病毒 H1N1 2009 型（IAV-H1N1 2009）核酸检测试剂盒(RT-PCR法)特点优势：
1. 特异性：所有产品使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
2. 重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3. 灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种呼吸道及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。
6. 优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。
甲型流感病毒 H1N1 2009 型（IAV-H1N1 2009）核酸检测试剂盒(RT-PCR法)性能指标：
1. 试剂盒检测特异性为100%
2. 检测试剂盒重现性为100%
3. 灵敏度可达到103/ml
4. 有效期为6个月
规格及成分
| 成分 | 编号 | 50 次纸盒包装 |
| MMLV 逆转录酶 (含 RI) | 80206A | 20 μL |
| RT Buffer（含 dNTP） | 60906C | 60 uL |
| PCR Mix 3.0（含染料） | 90805 | 1.5 mL |
| ND 阳性对照 | 896897 | 50 μL |
| ND 专一性引物一（正向引物） | yw896 | 50 μL |
| ND 专一性引物二（反向引物） | yw897 | 50 μL |
| RNase-free 水 | 80403 | 1 mL |
| 使用手册 | 11-171201sc | 1 份 |
自备试剂：样品 RNA。
甲型流感病毒 H1N1 2009 型（IAV-H1N1 2009）核酸检测试剂盒(RT-PCR法)使用方法:
一、样品 RNA 的制备
1、用自选方法抽提病毒样品 RNA。注意：可以选用本公司生产的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二：RT（逆转录）反应合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反应体系（20 μL 体系）:
| RNA 模板 | 0.01pg-500 ng （如果丌知道浓度则用 1-10 μL） |
| ND 专一性引物二（反向引物） | 2 μL |
| RNase-free 水 | 补水到 12 μL |
3. 严格按顺序加入 6μL RT Buffer（含 dNTP）和 2μL MMLV 逆转录酶（含 RI），
反应终体积为 20μL。
4. 42℃保温 60 分钟。此步为 RT 反应。
5. 70℃保温 10 分钟以终止反应，然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作为 PCR 模板使用，丌需要纯化。
三、PCR（60 μL 体系）
1、在 PCR 管中加入下列成分：
| 成 份 | 样品 | ND 阳性对照 | 阴性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 30 μL | 30 μL | 30 μL |
| cDNA 样品（上步的 RT 反应液） | 1-5 uL | 无 | 无 |
| ND 阳性对照 | 无 | 2 μL | 无 |
| ND 专一性引物一（正向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| ND 专一性引物二（反向引物） | 1 μL | 1 μL | 1 μL |
| 补水到 | 60 uL | ||
| 过程 | 温度 | 时间 | 其他 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
| PCR 反应 （40个循环） |
95℃ | 30 s | |
| 50℃ | 30 s | ||
| 72℃ | 40 s | ||
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | |
1、取 10-20μL PCR 产物直接在 PAGE 或琼脂糖凝胶上电泳，正确的扩增产物的大小为421 bp。
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文献和实验文献速递：传染病监控新方式？利用废水监测网络追踪腹泻病毒和痘病毒
研究背景 从2009年到2023年，世界卫生组织已经发布了7项国际关注的突发公共卫生事件（PHEIC）宣言，大约每2到3年发生一次严重的新发传染病疫情。及时和准确的监测工具对于监测病毒传播模式以及针对这些新出现的传染病采取有效的公共卫生干预措施至关重要。在新冠肺炎大流行期间，废水监测被证明是一种有效的工具，可以反映感染趋势，比传统临床监测更早地识别新出现的病毒变种。在后COVID-19时代，迫切需要在这一实际经验的基础上更广泛地应用废水监测，特别是对地方病和新出现的传染病进行更全面的监测
，其中规定了确诊病例的诊断方法：具有急性发烧呼吸道疾病的临床症状并且经实时荧光定量PCR （real-time RT-PCR）或病毒分离培养 （viral culture）实验室检测方法检验证实感染A（H1N1）型猪流感病毒。卫生部办公厅于4月30日印发了《人感染猪流感预防控制技术指南（试行）》的通知》[7],其中在实验室检测和病例诊断报告章节，内容如下：检测程序呼吸道标本应首先应用real time RT-PCR方法检测A型流感病毒的M基因、Swine（ H1N1）的HA基因和NP基因，以及质控对照
。世卫组织在26日发布的一份公告中对猪流感做出了详细介绍。世卫组织说，猪流感是一种发生在猪身上的高度传染性急性呼吸道疾病，由猪流感病毒引起。猪流感在猪中的发病率较高，但死亡率较低，仅为1％至4％。猪流感在猪之间主要通过空气悬浮颗粒、直接或间接接触、携带猪流感病毒但无症状的猪传播。猪流感常年都可能发生，在温带地区秋冬季节发病率会更高。许多国家采取注射疫苗的方法预防猪流感。 猪流感病毒大多是Ａ／Ｈ１Ｎ１型，但其他亚型也会在猪中传播，例如Ｈ１Ｎ２、Ｈ３Ｎ１、Ｈ３Ｎ２。其中，Ｈ３Ｎ２型被认为
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