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- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
54
- 英文名：
大提柱式藻类 RNAout
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
5次
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
点击了解更多RNA纯化产品：
大提柱式藻类 RNAout5次品牌详细介绍：
操作步骤:
1. 大提柱式藻类 RNAout5次品牌匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞，每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml，用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定，不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c．细胞悬液 离心收集细胞，每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol，反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2．将匀浆样品在室温（15-30℃）放置5分钟，使核酸蛋白复合物完全分离。
3．可选步骤：如样品中含有较多蛋白质，脂肪，多糖或胞外物质（肌肉，植物结节部分等）可于2-8℃10000×g离心10分钟，取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。处理脂肪组织时，上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，剧烈振荡15秒，室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层：底层为黄色有机相，上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中，水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中，如要分离DNA和蛋白质可保留有机相，进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml，室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟，离心前看不出RNA沉淀，离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
实验要点：
1．CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀，因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2．在最适条件下，DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状，很容易一下子就从溶液中钩出。不过，某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质，特别是多糖，使DNA 沉淀呈絮状或胶状，这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3．饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性，但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液，可减轻这两种现象，同时可加入适量的（—氯仿—=25:24:1），的作用是消泡，并使蛋白质层紧密，使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速，能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
以下是大提柱式藻类 RNAout5次品牌的相关产品：
DNA 快速连接试剂盒100 次 TRIzol 伴侣50 次
一站式 TA 克隆试剂盒20 次 Tris 饱和酚100mL
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次 Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )50L
一站式平末端克隆试剂盒20 次 Tricine-SDS-PAGE 阴极电泳液 ( 干粉 )10L
克必隆平末端克隆试剂盒（组成型）20 次 Tricine-SDS-PAGE 阳极电泳液 ( 干粉 )50L
大提柱式动物 DNAout4次 一站式乙酸 - 尿素 PAGE 电泳套装30 次
百万碱基级动物 DNAout10 次 一站式全血 mRNAout25 次
柱式软体动物 DNAout50 次 一站式平末端克隆试剂盒20 次
柱式昆虫 DNAout50 次 一站式动物 mRNAout25 次
血液 DNAout50 次 一站式蛋白质非变性 PAGE 套装 ( 中 pH)30 次
一站式乙酸 - 尿素 PAGE 电泳套装30 次 lambda(λ)DNA5μg
Tricine-SDS-PAGE 配胶液250mL lambda(λ)DNA5μg
Tricine-SDS-PAGE 配胶液1000mL lambda(λ)DNA5μg
Tricine-SDS-PAGE 上样液1mL L- 谷胱甘肽 ( 还原型 )5g
Tricine-SDS-PAGE 上样液5mL KT5823(PKG 抑制剂 )50μg
缓冲蛋白胨水（BPW） 英文名称； Buffer peptone water（BPW） 规格； 9ml*20支/包
3%氯化钠碱性蛋白胨水 英文名称； 3%Sodium Chloride Peptone Water 规格； 9ml*20支/包
0.85%无菌生理盐水（9ml/支） 英文名称； 0.85% Sterile Saline 规格； 9ml*20支/包
0.85%无菌生理盐水（10ml/支） 英文名称； 0.85% Sterile Saline 规格； 10ml/支*20
月桂基硫酸盐蛋白胨肉汤LST管（双料，含小倒管） 英文名称； Lauryl Sulfate Tryptose Broth 规格； 10ml/支*20
现隐肉汤 Presence Absence Broth 250g
心浸液琼脂 Heart Infusion Agar 250g
桔汁琼脂 Orange Serum Agar 250g
EEM培养基 EEM medium 250g
胰蛋白胨胆盐琼脂 Tryptone Bile Agar 250g
大提柱式藻类 RNAout5次品牌三糖铁管 用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选
LST发酵管（含小倒管） 用于大肠菌群、大肠杆菌的测定用于大肠菌群、大肠杆菌的测定
LST-MUG 用于大肠菌群、大肠杆菌的测定用于大肠菌群、大肠杆菌的测定
EC肉汤（含小倒管） 用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
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文献和实验等。 PCR 产物 两种方式：一种纯化后直接酶切连接；一种连 T 载体再往下切连接。我个人强烈建议第二种，连 T 载体。因为 PCR 产物直接酶切我觉得有两个缺点：①由于两头把手太短，虽说有保护碱基，但我觉得还是不如从质粒上往下切好切，而且容易切坏、切碎；②无法从电泳上看出来切没切开，因为也就切下了几个十几个 bp，带形没啥变化。连 T 载体的优点：①进载体后，大提一次的质粒夸张点说够用一辈子的，再说 PCR 那东西还不太稳定，一把多一把少的。②酶切会很清晰，切下来了就是有带，没切动
液层和红细胞层（见图1）。 图1 稀释脐带血离心前后的分层状态图 5） 向离心管中加入10mL 的RPMI 1640培养基洗涤细胞，250g，室温离心 10min ，弃上清。重复该步骤 1~2 次，即可用于后续试验。 3 注意事项 1） 血液新鲜程度是影响分离效果的关键因素，请尽量使用采集后24h内的血液进行CBMC分离。 2） 为保证细胞的活力，整个操作过程请轻柔，避免对细胞造成机械性的损伤。 3） 为保持细胞状态良好，请尽量缩短整个试验的周期。 4 脐带血单个
层（见图1）。 图1 稀释骨髓液离心前后的分层状态图 5） 向离心管中加入10mL 的生理盐水或PBS重悬细胞，250g，室温离心 10min ，弃上清。重复该步骤 1~2 次，即可用于后续试验。 3 注意事项 1） 不同种属动物单个核细胞的比重有一定差异，请选择合适的分离液进行骨髓单个核细胞的分离。 2） 骨髓液新鲜程度是影响分离效果的关键因素，请尽量使用采集后24小时内的骨髓液进行单个核细胞分离。 3） 为保证细胞的活力，整个操作过程请轻柔，避免对细胞造成机械
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