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- Sigma
- 进口
- C0130-100MG
- 2025年07月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温
- 库存：
现货
- 供应商：
联硕生物
- CAS号：
9001-12-1
- 规格：
1瓶
一般描述
胶原酶是一种可切割被称为胶原蛋白的三螺旋蛋白的蛋白酶。存在有三种类型的组织胶原酶，而它们都属于基质金属蛋白酶（MMP）家族。[1]从溶组织梭菌中获得的胶原酶具有非常强的活性，因为它可在低至4-10℃的温度下从两端对胶原蛋白进行消化。[2]粗胶原酶混合物含有两种主要的酶类型，即胶原酶和梭菌蛋白酶。[3]
应用
来自溶组织梭菌的胶原酶在生物学研究中具有广泛的用途，它可用于制备分离的细胞悬浮液。[3]该产品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿脑、肺和许多其他上皮组织的解聚。它还被证明可有效用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质大鼠肝细胞的分离以及肝细胞的制备。 胶原酶已用于研究晚期糖基化终产物所需的动脉组织的制备。该酶已经测试可以约1 mg/mL的浓度释放肝细胞。用于消化的浓度范围是0.1至5 mg/mL。
生化/生理作用
该胶原酶产物是由溶组织梭菌所分泌的酶混合物组成，且不同的产物可通过在分泌酶中所发现的10-18种化合物的比例而进行区分。 主要的成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和一种中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白及其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用对于从组织中有效释放细胞是必需的。 不同类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双（β-氨基乙基醚）-N，NN′,N′-四乙酸，β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯/基乙/酸和8-羟基喹/啉抑制。
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文献和实验「在过去的一年里，人类干细胞衍生的类器官作为细胞系模型和动物模型的桥梁，已经成为了新冠肺炎研究的有力工具【1】」。 对于新冠肺炎这类呼吸性疾病的研究，最常见的体外模型是肺类器官，即：由干细胞在体外进行 3D 培养，形成包含多种组织特异的细胞类型、可以自组装并部分模拟原生器官的结构和功能的「微器官」。 肺的类器官培养需要在体外模拟胚胎发育的过程。肺上皮来源于内胚层，通过一系列复杂的内胚层 - 中胚层介导的信号通路调控，经历内胚层诱导、前-后和背-腹模式化、肺发育、肺出芽、分支形态发生，最终
5 分钟，并进行分装。在 -20 °C 下保存裂解物。注意：分装细胞裂解物 (50 - 100 μL)，避免反复冻融循环。4. 在 37 ℃ 下解冻装有细胞裂解物的离心管。在微型离心机中以 16,000 × g 离心 5 分钟。三、上样和电泳1. 将等量的蛋白质和分子量标准上样到 SDS-PAGE 凝胶孔中。来源于细胞裂解物或组织匀浆的总蛋白的上样量为 20 - 30 μg，纯化蛋白的上样量为 10 - 100 ng。2. 在 100 V 下电泳 1 至 2 小时。可能需要对时间和电压进行一些优化
5.6。 ( 7 ) MS7（生根培养基）：2.15 g/L MS 培养基，10 g/L 蔗糖，15 mg/L 草胺膦或 5 mg/L 双丙氨膦，3~5 g/L phytagel，pH 5.8。 ( 8 ) MS8（盐胁迫培养基）：2.15 g/L MS 培养基，10 g/L 蔗糖，100 mmol/L NaCl (Sigma)，3~5 g/L phytagel, pH 5.8。 ( 9 ) MS9（渗透胁迫培养基）：2.15 g/L MS 培养基，10 g/L 蔗糖，200 mmol/L
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