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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
大提柱式动物 RNAout
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5次
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用和氯仿的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的(—氯仿—=25:24:1),的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
点击了解更多RNA纯化产品:
详细介绍:

公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
以下是大提柱式动物 RNAout5次说明书的相关产品:
AP 标记的抗生物素抗体10μL 环氧基磁珠2mL
HRP 标记的抗生物素抗体10μL 环孢霉素 A 溶液 ,10mg/mL1mL
显影定影套装1套 滑膜细胞生长因子5mL
显影粉1袋 红细胞裂解液 B 型 ( 流式细胞分析用 ) 100mL
定影粉1袋 红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 ) 100mL
凝胶法 miRNA 分离试剂盒 50 次 柱式腐殖酸清除剂30 次
一站式大提柱式 miRNAout5次 柱式腐殖酸清除剂100 次
一站式动物 mRNAout25 次 柱式粪便 RNAout50 次
一站式全血 mRNAout25 次 柱式粪便 DNAout50 次
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次 柱式分枝杆菌 RNAout50 次
柱式尿液 DNAout50 次 一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒30 次
柱式鼠尾 DNAout50 次 一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒100 次
柱式海洋动物 DNAout50 次 一步式 RT-PCR Mix 1mL
植物 DNAout50 次 一步式 PAGE 染液10 次
柱式植物 DNAout50 次 一步离心式石蜡清除剂100 次
霉菌和酵母菌显色培养基 英文名称; 规格; 1000(ML)
弧菌显色培养基 英文名称; Vibrio Chromogenic Medium 规格; 1000(ML)
MMO-MUG培养基 英文名称; 规格; 250g
阪崎肠杆菌显色培养基(DFI琼脂) 英文名称; 规格; 200g
VRB-MUG琼脂 英文名称; 规格; 100g
游离生物素测定培养基 Free Biotin Assay Medium 250g
气单胞菌培养基基础 Aeromonas Medium Base(Ryan) 250g
气单胞菌培养基添加剂 5支
布氏菌选择性培养基 Brucella Selective Medium 250g
C.L.E.D培养基 C.L.E.D Medium 250g
大提柱式动物 RNAout5次说明书氧化酶试纸 用于O157:H7菌氧化酶试验用于细菌的氧化酶试验
阪崎肠杆菌分离琼脂(ESIATM) 用于阪崎肠杆菌分离培养用途:用于阪崎肠杆菌分离培养用法称取本品 30.75g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用
阪崎杆菌分离琼脂(ESIATM) 用于阪崎肠杆菌分离培养用途:用于阪崎肠杆菌分离培养。用法称取本品 30.75g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
胰蛋白胨大豆琼脂 一种通用培养基,用于各种微生物的培养一种通用培养基,用于各种微生物的培养(AOAC EP IDF NMKL USDA USP)产品用法:称取本品 40.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。
操作步骤:
1. 大提柱式动物 RNAout5次说明书匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
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文献和实验在 RIPA 不可溶组分中,如果样品又是研磨困难的组织样品,则优先选择对膜蛋白和小分子量蛋白提取效率更高且不需要匀浆仪的 Invent 柱式法工具进行总蛋白提取[1]。 * 目标蛋白在某个特定细胞器上(内质网,高尔基体,溶酶体,线粒体,内体等)表达,且蛋白表达量较低,若用总蛋白检测时条带较弱,则推荐使用 Invent 柱式法工具富集特定细胞器蛋白后再检测,提高检出效率。 * 研究蛋白定位或研究蛋白转运过程,推荐使用 Invent 柱式法工具进行细胞组分分离,将样品分离为不同组分如分成细胞核,细胞浆,细胞
2, 其它稳定剂和增强剂 三DNA提取相关产品 1.柱式小量质粒DNA抽提纯化试剂盒:MTL001-1 50次 79元 2.DNA胶回收试剂盒: MTL002-1 50次 89元 3.动物DNAout(动物DNA提取试剂盒):3670-10 10 ml 90元 4.植物DNAout(植物DNA提取试剂盒):3672-10 10次 90元 5.血液DNAout(血液DNA提取试剂盒): 3671-10 10 次 90元 6.革氏阴性细菌DNAout提取试剂盒: 3673-10 10 次 90元
等。 PCR 产物 两种方式:一种纯化后直接酶切连接;一种连 T 载体再往下切连接。我个人强烈建议第二种,连 T 载体。因为 PCR 产物直接酶切我觉得有两个缺点:①由于两头把手太短,虽说有保护碱基,但我觉得还是不如从质粒上往下切好切,而且容易切坏、切碎;②无法从电泳上看出来切没切开,因为也就切下了几个十几个 bp,带形没啥变化。连 T 载体的优点:①进载体后,大提一次的质粒夸张点说够用一辈子的,再说 PCR 那东西还不太稳定,一把多一把少的。②酶切会很清晰,切下来了就是有带,没切动
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