HEPES，7365-45-9，H4034-500G

一般描述
HEPES缓冲液不会对细胞产生细胞毒性作用，因此可用于动物细胞培养。[1]
HEPES被视为可用于生物研究的最佳通用缓冲液之一。[2]在生理pH下，该分子是两性离子的，并在pH 6.8至8.2下可有效作为缓冲剂。HEPES已用于一系列应用，包括组织培养。它常用于在空气中对细胞培养基进行缓冲。HEPES 在 Mg 的体外实验中表现出了应用潜力。[3]
HEPES，即 4-(2-羟乙基)哌嗪-1-乙烷磺酸，是一种两性离子N-取代氨基*酸缓冲液。在 pH 为 6.8 ~ 8.2 的范围内表现出优异的缓冲能力，25°C 时 pKa 为 7.48。HEPES 被广泛认为是最通用的缓冲液之一，广泛应用于细胞生物学、生化和生物学研究。它的一个显著特性是不与金属离子反应。与许多缓冲液不同，HEPES 不会与大多数金属形成明显的配合物，这使得它适用于涉及金属离子的应用，且不影响其活性。这个特性增强了它作为“非协调缓冲区”的效用。在细胞培养中，即使在细胞呼吸引起的二氧化碳浓度波动中，HEPES 也能保持稳定的生理 pH 值。这使它有别于碳酸氢盐缓冲液 (NaHCO3)，后者虽然很常用，但在 pH 稳定性方面效果较差。

HEPES 在各种生物和生化过程中也被证明很有用。它的两性性使它适合作为在等电聚焦中产生 pH 梯度的分离器，这是一种经常用于蛋白质分离和分析的技术。此外，与三磷酸腺苷等取代胺基较少的缓冲液相比，HEPES 对 DNA 限制性内切酶反应的干扰最小。这使得它成为涉及 DNA 操作和分析的应用的技术。除了这些特定的应用之外，HEPES 在许多其他生物和生化过程中也很有价值，包括免疫沉淀、细胞裂解和活细胞成像。HEPES 的多功能性，加上卓越的 pH 缓冲能力和与其他分子的最小相互作用，使其成为各种研究领域不可或缺的工具。

应用
HEPES可用于：
对Dulbecco′s modified Eagle′s medium（DMEM）培养基进行补充以培养和维持细胞系[4][5]
作为血小板悬浮缓冲液的一种组分[6]
对Hank碱性盐溶液进行补充以用于洗涤胰腺组织[7]
作为在酶联免疫吸附测定（ELISA）中蛋白纯化和定量的洗涤缓冲液和封闭缓冲液中一种组分[8]
生物学溶液的pH调整和维持[8]
作为Hank平衡盐溶液（HBSS）和解离培养基中的一种组分用于研究神经发育[9]
用于组织匀浆以及来自细胞的溶质和核提取物的制备[10]
作为角质形成细胞和成纤维细胞培养基的一种组分[11]

特点和优势
经过测试，确认低水平的重金属污染，确保各种应用的适用性
25°C 时，极易溶于水，pH 值范围为6.8 - 8.2，pKa 为 7.5
金属离子结合可忽略
与三磷酸腺苷和磷酸盐等其他缓冲剂相比，对细胞的毒性较小
在宽 pH 范围内稳定
经过测试，确定内毒素和总需氧微生物计数
不含 DNase, NICKase、RNase、内切酶、外切酶和蛋白酶