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- FunGenome
- PCR005
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 规格：
1500U
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PCR产物克隆的基因
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p53
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NF-kB
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hRAD17
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SP1
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Apo-AV
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PPARγ
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SRC1
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片段大小
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1.2 kb
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1.7 kb
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2.0 kb
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2.4 kb
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1.3 kb
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1.43 kb
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4.2 kb
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获得无突变序列所筛选的克隆数
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FGTM Golden Taq
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1
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1
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1
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2
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1
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1
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2
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Pfu
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2
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3
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3
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4
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2
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3
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NA＃
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文献和实验PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶
重要。为了确保准确进行 DNA 拷贝，请确保选择高保真 DNA 聚合酶。高保真 PCR 酶具有 3'-5’ 核酸外切酶校对活性。当结合错误匹配的碱基对时，DNA 聚合酶停顿，导致合成暂延。合成暂延 允许去除错误匹配的核苷酸并使用正确的核苷酸取代。 保持序列准确的 DNA 聚合酶的绝佳选择是 Invitrogen SuperFi 或 Thermo Scientific Phusion 高保真DNA聚合酶。这两种酶具有高保真度，准确度是 Taq DNA 聚合酶的 300 倍或 52 倍，并且具有很高的产率。 Q
释放酶活；一类是抗体法修饰的热启动酶，如 Champagne Taq ，预变性 95℃30s 即可释放酶活。使用时注意预变性时间，方能获得满意的扩增效果。 2. 选择 Lamp 扩增长片段 大于 5Kb 的长片段又该如何扩增呢？如果实验对保真度的需求不高，那么就可以使用 LAmp DNA 聚合酶。其保真度是 Taq 酶的 6 倍，可扩增超过 20Kb 的基因组、cDNA 片段，对于低拷贝、低纯度、以及不同 GC 含量的模板都具有很高的成功率。 3. 选择高保真酶快速高效扩增 如果实
结果并非如此。如果大家需要使用热启动酶，建议向厂商索取的检测数据（如分子信标法检测，Ma et al., Anal Biochem, 2006），以证明其确实具有热启能力。2. 保真性保真性就是扩增过程中的错配率，对于 cDNA 克隆、文库构建的老师来说是尤为重要的参数。Taq 酶的保真性较低，而 Pfu、HiFi 等高保真酶具有 3’-5’ proofreading 功能，可以校正错配，保真度较高。保真性高于 Taq 酶 50 倍左右是比较常见的数值。我们也可以用 Lac I 分析的经典方法自己检测一下
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