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- 供应商:
101000006
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1.5 mL transfection reagent + 4 x 60 mL jetOPTIMUS
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jetOPTIMUS
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101000006
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101000006
- 规格:
1.5 mL
难细胞转染试剂jetOPTIMUS
适合难转贴壁细胞的DNA转染:原代细胞(如上皮、内皮、成纤维、肝细胞等)、干细胞(ES、MSC、iPS)和难转癌细胞系;
对于难转细胞,一般情况我们都会考虑采用电转或病毒转,但电转往往对细胞损伤很大,需要摸索合适的电场强度;病毒转染前需要包装病毒,流程复杂,需要注意安全性,耗时耗力。小达君建议先用高效化学试剂做转染,看测试结果是否达到实验要求,如果可以,这便是便捷、性价比高的不错之选。
今天的主角jetOPTIMUS®是款阳离子聚合物转染试剂,因改善了其内化效力和内体逃逸的能力,特别适合难转贴壁细胞的DNA转染
特点如下:
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适合难转贴壁细胞的DNA转染:原代细胞(如上皮、内皮、成纤维、肝细胞等)、干细胞(ES、MSC、iPS)和难转癌细胞系;
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转染效率高:促进难转细胞基因的高表达;
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性价比高:转染试剂和DNA用量更少;
-
毒性低:对细胞温和,适用于敏感细胞;
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操作简便:优化protocol,省时省力。
相关数据:

△图1. jetOPTIMUS®有效提高难转细胞的转染效率。根据L3K和jetOPTIMUS®说明书要求进行转染,在24孔板中转染GFP质粒到多种细胞系,24小时后采用FACS检测转染效率。
|
24孔板中DNA的转染(标准protocol) |
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|
转染试剂 |
每孔转染试剂用量(μL) |
每孔DNA用量(μg) |
每管1.5 mL试剂可做的转染次数 |
|
jetOPTIMUS® |
0.25-0.75 |
0.25-0.5 |
2000-6000 |
|
L3K |
0.75-1.5 |
0.5 |
1000-2000 |
△表1. jetOPTIMUS®和DNA用量更少,与L3K相比性价比更高。

△图2. 使用jetOPTIMUS®转染24小时后,细胞仍然健康并保持良好形态。根据L3K和jetOPTIMUS®说明书要求进行转染,24小时后在相差显微镜下观察MDCK和VERO细胞的状态。

△图3. jetOPTIMUS®操作简便。
产品信息:
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货号 |
产品名称 |
规格 |
品牌 |
|
PT-117-01 |
jetOPTIMUS |
0.1 mL |
Polyplus |
|
PT-117-07 |
0.75 mL |
||
|
PT-117-15 |
1.5 mL |
Polyplus-transfection®,中文名保利嘉,是来自法国的一家专注核酸转染的生物技术公司。因为专注所以专业,其产品适用于体内和体外转染,包括DNA、siRNA及其他寡核苷酸、蛋白和多肽转染。高效率、低毒性、操作简便和高性价比的产品受到广大科研工作者喜爱,广泛应用于基因功能研究、蛋白生产、病毒包装和动物模型的构建。公司于2002年获得ISO 9001证书。
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文献和实验50 代以内的细胞。50 代以后的细胞不建议采用,因为转染效率会随时间的推移而下降。 6.避免使用抗生素 从铺盘直到转染后 72 小时内,应避免使用抗生素。在转染的细胞中,已经显示出抗生素积累到了毒性水平。为获得最佳的siRNA输送效果,某些细胞和转染试剂需要无血清的条件。我们建议在正常的生长培养基和无血清培养基中均做转染试验,以确定每个转染实验的最佳条件。 7.使用优化的试剂转染 siRNA 请使用您的细胞类型适用的最佳 siRNA 转染试剂和试验方案。对于 siRNA 试验,转染试剂的选择
融合,也有自身环形形式存在的。与基因组融合后的质粒可以在细胞分裂的时候带给子细胞,所以可以用来筛选稳定细胞株。而有的质粒则在传代过程中丢失。每个转染细胞内的质粒数量就很难说了,看转染效率吧。从概率来说,当然是数量越多,蛋白表达会高一点,当然也不是绝对的。最常用的转染试剂包括磷酸钙、PEI、lipofectamine等等,还有各个生物公司有自己的试剂,质量应该也都不错。 bioenw 质粒转染的效率不如病毒转染的效率高,像慢病毒,可以稳定整合到基因组,子代也不会丢失
基因。实验报告基因用于测试实验条件下基因的表达,而对照报告基因作为内对照,以使实验报告基因测试的结果归一化。作归一化可消除实验过程中减弱实验准确度的变化,如培养细胞的数量、细胞转染 及裂解的效率等。在研究转录调控启动子活性中,具体实验步骤如下。 1. 质粒转染细胞 1) 细胞 铺板:将细胞按70%的汇合度接种到96孔板。 2) 转染:16h后转染萤光素酶报告基因 质粒和RNA,每个样品设置6个复孔 a) 配制DNA和转染试剂 : 96孔板转染质粒时











