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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
常温
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现货
- 供应商:
联硕生物
- CAS号:
50-70-4
- 规格:
1瓶
应用
可用于洗涤原生质球[1],以及在等电聚焦尽可能减少琼脂糖凝胶中的内渗透流。[2]可用于诱发渗透应力。
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文献和实验FUS/TLS assembles into stress granules and is a prosurvival factor during hyperosmolar stress.
Reddy Ranjith K Sama et al.
Journal of cellular physiology, 228(11), 2222-2231 (2013-04-30)
] 。在上述基础上,我们进一步优化了分离方法,并将其用于本实验室大规模的叶绿体分离和蛋白质组分析工作中 [16] 。这种方法没有进行过叶绿体蛋白质输入活性的测试,但是本方法具有产率高,污染低的优点,尤其适合于叶绿体的蛋白质组分析。关于用于体外蛋白质输入活性试验的叶绿体分离方法,可以参考其他的一些报道 [17] 。2. 材料 ( 1 ) 介质 A ( 匀浆缓冲液,见注释 1):50 mmol/L HEPES-KOH ( pH 8.0) 、330 mmol/L 山梨醇、2 mmol/L EDTA
液,加入6ml DMEM完全培养基,37℃孵育过夜,再换液。 7、培养过程中观察细胞生长情况。约2周后可观察到细胞病变(CPE)出现(如用pAdTrack-CMV质粒,由于含GFP,可观察到绿色荧光)。四、重组病毒鉴定 1、转导10-14d后,收集细胞沉淀,加入2ml灭菌的PBS混悬,冻融细胞,离心后收集上清保存于-80℃。 2、取30-50% 步骤1中上清,感染50-70%饱和度的25cm2方瓶中293细胞。2-3d后出现明显细胞病变。 3、感染后3-5d,当1/3-1/2细胞漂浮时
为重组缺陷性菌株,可稳定扩增已鉴定的重组质粒),扩增细菌并纯化质粒。 三 重组病毒质粒转导 293 细胞 1 293细胞培养:转导24小时前,以方瓶为例,接种2×106 293细胞于25cm2 方瓶,使生长密度约50-70%。(也可以使用6孔或96孔板) 2 以PacI单酶切重组病毒质粒(转导25cm2 方瓶约需4µgDNA),完全线性化后,乙醇沉淀,再以20 µl ddH2 O溶解。 3 脂质体包裹质粒(以Lipofectamine为例):每4µ
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