- ￥257
- GIBCO
- 进口
- 12605010-100mL
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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低温
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见标签
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现货
- 供应商：
Gibco
- 规格：
100mL
TrypLE Express 是一种非动物源性重组酶，适用于解离多种贴壁哺乳动物细胞，包括 CHO、HEK 293、A549、原代人角质化细胞和胚胎干细胞。TrypLE Express 可切割赖氨酸和精氨酸 C-末端上的肽键，并可直接替代胰蛋白酶。其极高的纯度提高了特异性，减少了一些胰蛋白酶提取物中存在的其他酶对细胞可能造成的损害。
针对广泛的细胞培养应用，我们提供了多种 TrypLE 配方。
与胰蛋白酶和其他解离试剂相比，Gibco TrypLE Express 具有以下特点：
对细胞作用温和
• 在室温下稳定
• 易于使用
• 非动物源性 (AOF)
该 TrypLE Express 进行了以下改良：
包含
•酚红
•EDTA
提供 TrypLE 溶液的配方，但对酶浓度保密。
对细胞作用温和
由于仅一种酶发挥作用，TrypLE Express 极高的纯度提高了特异性。这减少了一些胰蛋白酶制备物和其他蛋白酶提取物中存在的多种酶的切割作用造成的损害。
在室温下稳定
TrypLE Express 在室温下稳定且为即用型。TrypLE Express 在室温下或 2–8°C 下能够保持稳定 24 个月，因此储存和处理简单方便。
易于使用
TrypLE Express 可直接取代现有方案中的胰蛋白酶。此外，单独稀释即可使 TrypLE Express 失活，无需使用胰蛋白酶抑制剂（如 FBS）。
非动物源性 (AOF)
与猪胰蛋白酶不同，TrypLE Express 不含动物来源组分。
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文献和实验0.1%（w/v）的明胶，室温静置 15min 至明胶凝固。 2、在明胶上接种丝裂霉素处理过的 MEFs 细胞悬浮液，细胞数约为 1.8×106个。放置在 7℃，5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基，将 ESCs 接种于明胶上，添加 10ml ESCs 培养基，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。 4、向 hESCs 中加入 1ml TrypLE Express，并将培养皿放置在 37℃ 条件下进行解离，直到所有的细胞都以小细胞
（依此类推）。 15、将收集的类器官转移到 5 ml Eppendorf 管中并放在冰上，4℃ 条件下 220g 离心 5min。 16、去除离心上清，并添加 37℃ 预热的 TrypLE Express（含 10μM Y27632）。轻轻旋转 Eppendorf 管，使类器官与 TrypLEExpress 混合均匀。 17、37℃ 条件下将类器官与 TrypLE 孵育 10min（致密型类器官）或 5min（低粘性和囊性类器官）。 18、加入 500μl 预冷的 DMEM/F12 终止消化，4℃
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
玻片中，用P-200移液管去除残留的1X PBS (D8537)。避免通过未剪去尖端的P-200移液管吸入类器官。 用0.5 mL Blocking Buffer（5%马血清+ 0.5% Triton X-100，溶于1X PBS中）在4℃留置一夜或室温下留置2-4小时，渗透固定类器官。注：推荐使用与二抗宿主同物种的血清。 用P-200移液管从含类器官的载玻片上移除Blocking Buffer。避免P-200移液管头吸入类器官。 在Blocking Buffer中制备一抗(300-500 µL
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