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- GIBCO
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- 16600082-10x500ml
- 2025年07月15日
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Gibco
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10x500ml
McCoy's 5A（改良型）培养基是一种通用培养基，支持多种类型的原代细胞、已建立的细胞系以及活检组织的外植体的增殖。这种培养基可支持源自正常骨髓、皮肤、脾脏、肾脏、肺、大鼠胚胎及其他组织的原代哺乳动物细胞的生长。
这种 McCoy's 5A 经过如下改良：
包含不含
•高糖
•丙/酮酸钠
•L-谷氨酰胺
•HEPES
•细菌蛋白胨
• 酚红
可提供完整配方。
使用 McCoy's 5A（改良型）培养基
Thomas McCoy 起初将 McCoy's 5A 培养基配制为基础培养基 5A 的改良版本。与其他培养基不同，McCoy's 5A 含有还原剂谷胱甘肽、细菌蛋白胨和高浓度葡萄糖。本产品还包括 Hsu 博士 Hanks' 盐添加剂以支持在 CO2 培养箱外使用。McCoy's 5A（改良型）培养基需要添加血清，通常添加 10% 胎牛血清 (FBS)。McCoy's 5A（改良型）培养基使用碳酸氢钠缓冲系统 (2.2 g/L)，因此需要 5–10% CO2 环境来维持生理 pH 值。
cGMP 生产和质量体系
McCoy's 5A（改良型）培养基在位于纽约格兰德岛的符合 cGMP 要求的工厂内生产。该工厂是在FDA登记的医疗器械生产商，且通过ISO 13485标准认证。为确保供应链的稳定，我们同时提供由我们的苏格兰工厂生产的相同 McCoy's 5A（改良型）培养基产品 (26600-080)。后者亦是在FDA登记的医疗仪器生产商，且符合ISO 13485标准。
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文献和实验，较为常用的量为5%～10%的比例，而特殊的低血清培养基血清量可降至3%左右，细胞的形态和功能不受影响。注：SLM120为清大天一公司低血清培养基，上图为培养24小时细胞密度，下图为48小时细胞密度。血清可在培养基灭菌后加入，也可与培养基混合后一起过滤。血清的添加一方面补充了细胞生长、增殖所需的一些因子（如生长因子等），另一方面也增加了培养基的黏滞度，这样可以降低细胞在悬浮培养中或被胰蛋白酶消化后的损伤。但是血清的加入也带来了很多问题，血清都是批量生产，各批之间差异很大，血清含一些对细胞产生毒性
时间不宜超过 2min。 25、将细胞悬液转移至 15ml 离心管中，加入 10ml 预冷的 DMEM/F12 培养基（含 10% FBS）。4℃ 条件下 220g 离心 5min，取细胞沉淀。 26、将所得细胞重复 8-12 步骤，完成 OC 类器官复苏。 图 2. OC 类器官的不同形态表型。即致密（左），囊性（中）和低内聚（右）型 OC 类器官。比例尺 200 μm【4】。 卵巢癌类器官样本来源不局限于活检样本或手术样本，腹水和胸腔积液中的癌细胞也同样可以用于构建 OC 类器官。培养
1 培养基换液，细胞将重新聚合成EB。 6、培养 24h 后，将 EB 转移到 U 型底低吸附的 96 孔板中，加入 Step2 培养基，培养 36h。 7、将细胞用 Step3 培养基换液，培养 48h。 8、将细胞用 Step4 培养基换液，培养 42h。 中肾管（Wolffian duct, WD）前体细胞成熟 9、将上清吸出，加入 0.25% 胰酶/EDTA 至没过细胞，37℃ 消化 6min 解离细胞球。 10、血清封闭后，加入含有 CXCR4/KIT 抗体的稀释液（含 1×HBSS
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