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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
86
- 保修期:
半年
- 现货状态:
现货
- 供应商:
百奥莱博
- 规格:
18×10ml
特别提示:包括18孔10ml有机离心管管架在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:18孔10ml有机离心管管架
产品货号:QN3099
产品规格:18×10ml
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文献和实验、在立体显微镜下,可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体,并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。 中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后,将微量离心管垂直放置在管架上 10min,此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清,控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻,添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml),Noggin (终浓度100
皿放置在 37℃ 条件下进行解离约 5-10min,直到所有的细胞都以小细胞块或单细胞的形式漂浮。 4、向每个孔中加入 5ml 的 DMEM-F12,以充分稀释 Dispase。 5、将所有细胞转移至离心管中,室温下 300g 离心 3min,收集沉淀细胞。加入 DMEM-F12 培养基,以 1:6 的比例接种在 Matrigel 包被的 24 孔培养板中,向每个孔中加入 0.5ml 预热的 mTeSR1 进行培养,至细胞汇合度达到 45-75%。 定向分化为内胚层和前肠球体 6、将 24 孔板
清洗后,再次 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 17、将所得沉淀按照 1:3-1:5 的比例重复 10-13 步骤(具体比例通过类器官的汇合度确定),完成传代。 类器官冻存 18、取 1-2 个孔的类器官,消化离心后取细胞沉淀,加入 1ml 细胞冻存液。 19、将细胞重悬后转移至冻存管中,利用程序降温盒缓慢降温至 -80℃。 20、第二天,将样品转移到液氮中长期储存。 类器官复苏 21、将液氮冻存的 CRC 类器官放置在 37℃ 水浴锅中进行解冻,水浴时间不宜超过 2min。 22
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