SW480细胞[SW 480/ SW-480]，人结肠癌细胞

1.  细胞名称：SW480细胞，
2. 细胞描述：SW480源自一位51岁白人男性患者的原位直肠腺癌，而SW620源自同一病人一年后的淋巴结转移灶。该细胞CSAp  和直肠抗原3阴性；角蛋白阳性；p53基因第273位密码子的G→A突变引起Arg→His替代，309位密码子的C→T突变导致  Pro→Ser替代；细胞p53蛋白表达水平升高；癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表达呈阳性；未检  测到癌基因N-myc的表达；不表达Matrilysin（一种与肿瘤侵袭相关的金属蛋白酶)。有报道称该细胞表达GM-CSF。ras原  癌基。
3. STR鉴定正确结果:Amelogenin：X；CSF1PO：13，14；D13S317：12；D16S539：13；D18S51：13；D19S433：   13；   D21S11：30，30.2；D2S1338：17，24；D3S1358：15；D5S818：13；D7S820：8；D8S1179：13；FGA：24；TH01：   8；TPOX：11；vWA：16；  
4. 培养基：L15+10%FBS+1%双抗
5. 细胞形态：上皮型 
6. 生长方式： 
7. 培养条件：37℃，100%空气
8. 发货方式：复苏后发货：复苏细胞后发货，货期一周左右，免运费（气温较好建议复苏后发货）；冻存发货(干冰运输）：需额外增加干冰运费，选择干冰运输的发两管细胞，为了保证客户接种可靠性多发一管。
9. 支原体检测：阴性

二、细胞接收后的处理

1. 收到T25方瓶细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们（冻存管细胞收到后直接37℃水浴复苏或直接放置于液氮中长期储存）。
2. 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3. 弃去T25瓶中的培养基，换用新鲜的完全培养基。
4. 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代。
5. 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。

三 本公司的细胞培养操作规程，供参考
1、培养基及培养冻存条件准备：

1. 准备L15培养基，90%；优质胎牛血清，10%。
2. 培养条件： 气相：空气，100%；； 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

1. 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2. 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

3、贴壁细胞传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化2-3分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3. 轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1200RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
4. 移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。

4、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行，最后的重悬液使用血清。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X10⁶个细胞冻存。


仅供科研使用。