大量细菌基因组DNA提取试剂盒

特别提示：包括大量细菌基因组DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：大量细菌基因组DNA提取试剂盒
英文名称：Bacterial massive genomic DNA Extraction Kit
产品货号：ALH139
产品规格：20次|50次

本试剂盒用于快速的从各种细菌中大量提取基因组DNA。细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后)，首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，zuì后纯净的基因组DNA通过*丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份（20次）：
细胞核裂解液———————90ml×2
蛋白沉淀液————————60ml
DNA溶解液————————10ml
RNaseA(10mg/ml)—————500μl

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚等试剂。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.结果稳定，产量高，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50 kb -150kb，可直接用于构建文库，PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到3,000xg，可容纳50ml 离心管的台式离心机。
2. 用户需自备*丙醇、70％乙醇、0.5M EDTA 和Lysozyme（溶菌酶）(用于革兰氏阳性菌)、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的细菌细胞量，请联系我们索取其它处理量的操作手册。

储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：细菌基因组DNA大量提取试剂盒

除了大量细菌基因组DNA提取试剂盒,细菌基因组DNA大量提取试剂盒，我公司还供应以下相关产品：



名称：红细胞裂解液A型(核酸纯化)
货号：BTN60403
规格：250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份，不含DNA和RNA，其所含血红素能抑制PCR反应，所以先用本产品裂解红细胞，再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。

产品特点：
1.快速，一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/氯*去蛋白质。
2.高效，一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞，一般样品zuì多只需要处理两次。
3.扩容性好，可以一次处理多达几十毫升的样品，也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在装有抗凝血液的离心管中，按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟，小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中，轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞，可以直接用于后续的实验。

名称：鱼类组织DNA提取试剂盒
货号：ALH181
规格：50次|100次
本试剂盒采用独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， zuì后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。本试剂盒适用于快速提取各种鱼类、虾类、扇贝等组织基因组DNA。

试剂盒组份(100次)：
裂解液SL————————————20ml
结合液CB————————————20ml
抑制物去除液IR—————————50ml
漂洗液WB————————————25ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
蛋白酶K————————————2×20mg
吸附柱AC————————————100个
收集管(2ml)——————————100个

注意事项：
洗脱液EB 不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH 大于7.5， pH 过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA 应该保存在－20℃。DNA 如果需要长期保存，可以用TE 缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl， 1mMEDTA，pH 8.0），但是EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
提示：第一次使用前请先在漂洗液WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
1. 切取不多于30mg 的组织材料，放入装有180μl 组织裂解液SL 的1.5ml 离心管中，涡旋振荡15 秒。
根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果裂解困难，可先用液氮研磨。
2. 加入20μl 的蛋白酶K 溶液(20mg/ml)，立刻涡旋振荡充分混匀。将裂解物放置在55℃水浴1-3 小时或者直到组织消化完全。
不同组织裂解时间不同，通常需0.5–2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
可选做步骤: 如果RNA 残留较多，需要去除RNA，可在完成步骤2 后加20μlRNase A(25mg/ml)溶液，振荡混匀，室温放置5-10 分钟。
3. 加入200μl 结合液CB，立刻涡旋振荡充分混匀，70℃放置10分钟。
4. 冷却后加100μl *丙醇，充分颠倒或涡旋振荡充分混匀，此时可能出现絮状沉淀。
5. 将上一步混合物和可能的沉淀都加入一个吸附柱AC 中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm 离心60 秒，倒掉收集管中的废液。
如果有不溶组织物可能堵住枪头，可将枪头在吸水纸上轻蹭去除不溶物；如果吸上来的混合物少则可以将枪头和不溶物一起弃去，该做法是为了去除不溶物，以免堵塞离心柱。
上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要，混匀不充分严重降低产量，必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。
6. 加入500μl 抑制物去除液IR，12000rpm 离心30 秒，弃废液。
7. 加入700μl 漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12000rpm 离心30秒，弃掉废液。
8. 加入500μl 漂洗液WB，12000rpm 离心30 秒，弃掉废液。
9. 将吸附柱AC 放回空收集管中，13,000rpm 离心2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10. 取出吸附柱AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加100μl 洗脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中预热效果更好），室温放置3-5 分钟，12000rpm 离心1 分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2 分钟，12000rpm 离心1 分钟。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是zuì小体积不应少于50μl，体积过小降低DNA洗脱效率，减少DNA产量。
11. DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：虾DNA提取试剂盒|扇贝DNA提取试剂盒|鱼DNA提取试剂盒