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- 上海谷研
- GOY-0943B
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- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
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- 肿瘤类型：
详见说明书
- 供应商：
上海谷研
- 库存：
53
- 英文名：
Rat EyePrimaCell：Normal Trabecular Meshwork Cells
- 生长状态：
贴壁；悬浮
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 细胞形态：
详见说明书
- 免疫类型：
详见说明书
- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 规格：
1.2ML/1.5ML
1. 细胞纯度高：原代分离得到的目的细胞最高纯度可达到95%以上；
2. 细胞活力强：原代分离的细胞一般不能长久传代，提供P0-P3代的细胞，活力达80%以上，无污染；
3. 多种鉴定方式：可根据需求提供流式细胞检测、免疫细胞化学、Realtime PCR及蛋白印迹等多种检测方法。
大鼠小梁网细胞培养试剂盒规格【Rat EyePrimaCell：Normal Trabecular Meshwork Cells】
小梁网细胞在房水流动机制中发挥重要作用。其中，在小梁网细胞中有特定的神经递质和神经肽受体，其中包括肾上，乙酰胆碱和神经肽Y。在小梁细胞中，一长串的血管活性多肽和生长因子能够触发细胞内信号传导机制。小梁网细胞可合成不同类型的细胞外基质蛋白以及金属蛋白酶。 利用本公司试剂盒中提供的小梁网组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的小梁网组织能使得小梁网组织中细胞的一些功能特性发生改变，从而将小梁网细胞分离开来。
本试剂盒适用于分离培养大鼠小梁网细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的小梁网原代细胞中成纤维细胞的含量。 大鼠小梁网细胞培养试剂盒适合于培养大鼠的小梁网细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM大鼠小梁网细胞组织解离液（3×1ml） （2）大鼠小梁网细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM大鼠小梁网细胞成纤维抑制剂（1ml（500ᰀ
实验试剂：
1、大鼠小梁网细胞培养试剂盒规格培养基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement
2、冻存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO
3、洗涤液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+ 1% P/S
4、染色液： 0.4% Trypan Blue
5、消化液： PriCells Isolation of Primary Cell Kit
6、检测试剂：鼠抗人及大鼠desmin一抗，肌球蛋白（myosin）单克隆抗体
实验操作：
1、 大鼠小梁网细胞培养试剂盒规格新生小鼠拉颈椎处死，乙醇消毒腿部，在超净工作台内，取肌肉于平皿，Hank’s洗3次，剔除脂肪、结缔组织，将肌肉标本剪约0.1cm3小块；
2、 将剪碎的肌肉移至离心管，Hank’s洗3次，静置1min，弃去上层液及漂浮组织
3、 向上述离心管中加入0.25%胰酶，37度水浴消化20min，每5min摇动或吹打1次离心管，然后加入生长培养基终止消化；
4、 反复吹打后，依次100，200，400目过筛，滤液收集后，1000r/min离心10min；
5、 弃去清夜，用生长培养基重悬细胞，悬液加入未经PPL包被的培养瓶中，差速贴壁去除成纤维细胞，37度培养1h后，转移包被瓶中，生长培养基培养，4d换液，以后每天换液1次。
氯霉素(植物细胞培养级)Chloramphenicol质量规格：>99%,用于植物细胞培养
氯霉素Chloramphenicol质量规格：>99%,BR
氯美扎酮（标准品）Chlormezanone质量规格：UV法溶出度检查
氯米帕明N氧化物Clomipramine14171-67-6
氯尼达明Lonidamine质量规格：>99%,BR
氯诺昔康(标准品)Lornoxicam质量规格：HPLC>99%,标准品
氯诺昔康-d4Lornoxicam-d4质量规格：美国进口
氯诺昔康Lornoxicam质量规格：>99%
氯普噻吨（标准品）Chlorprothixene质量规格：检查
氯普噻吨Chlorprothixene质量规格：>98%,BR
氯前列醇钠(DL型）DL-Cloprostenol55028-72-3
氯前列醇钠(D型）D-Cloprostenol62561-03-9
氯冉酸(>98.0%(HPLC)(T))Chloranilic87-88-7
氯噻嗪（标准品）Chlorothiazide质量规格：供HPLC法系统适用性试验用
氯舒隆(标准品)Clorsulon质量规格：>98%,标准品
大鼠小梁网细胞培养试剂盒规格星形肌动蛋白抗体 订购|咨询
精氨酸酶1抗体 订购|咨询
腺苷酸激酶结构域蛋白1抗体 订购|咨询
卡尔曼综合症基因1抗体 订购|咨询
卵巢、胎盘、前列腺、睾丸蛋白22抗体 订购|咨询
三磷酸腺苷结合盒转运蛋白7抗体 订购|咨询
Na+/K+-ATPase α1 钠钾ATP酶α1抗体 订购|咨询
磷酸化钠钾ATP酶α1多肽抗体 订购|咨询
肌动蛋白样蛋白6B抗体 订购|咨询
系统性红斑狼疮相关蛋白TREX1抗体 订购|咨询
原代细胞分离：
一、大鼠小梁网细胞培养试剂盒规格细胞培养
1取材 在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。2培养 将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。3冻存及复苏（可参阅后面有关章节）为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。
二、原代细胞分离
凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。1悬浮细胞的分离方法组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，最简单的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。2实体组织材料的分离方法对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法（物理裂解）和消化分离法。
三、细胞增殖检测技术
目前主要有两种用于检测细胞增殖能力的方法。一种是直接的方法，通过直接测定进行分裂
的细胞数来评价细胞的增殖能力。另一种是间接的方法，即细胞活力（cell viability）检测方法，通过检测样品中健康细胞的数目来评价细胞的增殖能力。显然，细胞活力检测法并不能最终证明检测样品中的细胞是否在增殖。如细胞在某一培养条件下会自发启动凋亡程序，但药物的干扰可抑制凋亡的发生；这时若采用细胞活力检测法，显然可以区分两种条件下的细胞数量，但我们并不能从药物干扰组细胞数大于对照组的事实说明药物可促进细胞增殖的结论。所以最直接的证据应该采用方法一。
其中常见检测：CCK8检测法 ，MTT检测法，Brdu检测法，Edu检测法，平板克隆形成。
四、细胞周期检测技术
细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。
常用的方法：流式检测细胞周期，标记有丝分裂百分率法。
五、细胞凋亡检测
常见检测方法：流式检测细胞凋亡，线粒体膜电位，活性氧检测，Hoechst染色，电镜，TUNEL。
六、细胞转移能力检测
常见检测方法：细胞划痕实验，Transwell实验，Invasion实验
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文献和实验1、如何增加外泌体试剂盒的提取效率？ 答：首先，样品准备阶段确保样品的质量和数量充足；在提取阶段，加入 ECS 试剂后可以通过增加静置时间来提高提取效率，但同时也可能影响到纯度，因此静置时间也需要适当控制，初次实验可以考虑静置过夜。 2、离心后无法看到沉淀如何处理？ 答：样品中的外泌体是微量的存在，离心后无法看到沉淀属于正常现象。建议离心后用 PBS重悬沉淀时不仅洗脱肉眼可见的沉淀部位，还要吹洗离心管外侧靠近底部的狭长区域，具体位置根据离心机倾斜角度决定。建议在下次样品准备阶段确保样品的质量
性选择不同强度的解离方式。 （1）根据肿瘤组织的坚硬度和目的细胞不同，可以选择合适的解离方案。 （2）剔除坏死/出血区域（剪刀精细修剪），保留活性肿瘤组织。 （3）由于肿瘤组织比较坚硬，会产生较多碎片和死细胞，影响下游实验可以通过Ficoll或者去死或碎片去除试剂盒（Debris Removal Solution，130-109-398）优化肿瘤样本。 6. 如何得到肝实质细胞？ 小鼠和大鼠的肝脏组织包含实质细胞和非实质细胞（Kupffer细胞、肝星状细胞、肝窦内皮细胞、胆管上皮细胞、免疫
个核型相差不大的双核细胞，计算微核率。【注意事项】实验前请自行准备 RPMI 1640 培养液、牛血清、细胞培养瓶、0.075mol/L 氯化钾溶液、甲醇、冰醋酸、吉姆萨染液、胰蛋白酶、24 孔细胞培养板、灭菌枪头、无菌移液管、二氧化碳培养箱、振荡器、15、50 mL 离心管等，所有耗材需做无菌处理。汇智泰康针对不同遗传毒性实验，开发了遗传毒性 Ames 试剂盒，微量波动 Ames（Mini-Ames）试验试剂盒，体外染色体畸变试剂盒，体外微核试验试剂盒，TK 基因突变试剂盒，HGPRT 基因
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