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天津科斯莫生物技术有限公司
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Taqman探针分析法检测SNP
Taqman探针分析法检测SNP
原理:
针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’端和3’端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。
适宜范围:
Taqman探针分析法检测SNP适用于低通量的SNP检测。
实验流程:
1、目标基因引物、探针设计合成
2、样品基因组抽提
3、引物探针有效性检测
4、样品检测
相关要求(客户提供):
客户请提供准确的基因名称和序列以及详细的SNP位点信息。
样品要求:
1、血液样品(至少4ml、需加EDTA),针对血液样品,根据实际情况酌情加收DNA提取费用;
2、如客户提供基因组DNA样品,需-20度条件下保存和运输。
纯度要求:OD260/280在1.6-1.8之间;OD260/230在1.8-2.2之间。
浓度要求:基因组DNA浓度>100ng/ul。
最终结果:
具体试验流程(包括:实验步骤;主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号;试剂厂家、批号)),电泳图,定量PCR结果,统计分析结果等。
原理:
针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增。探针的5’端和3’端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时,该探针与模板退火,即产生了适合于核酸外切酶活性的底物,从而将探针5’端连接的荧光分子从探针上切割下来,破坏两荧光分子间的PRET,发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。
适宜范围:
Taqman探针分析法检测SNP适用于低通量的SNP检测。
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1、目标基因引物、探针设计合成
2、样品基因组抽提
3、引物探针有效性检测
4、样品检测
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样品要求:
1、血液样品(至少4ml、需加EDTA),针对血液样品,根据实际情况酌情加收DNA提取费用;
2、如客户提供基因组DNA样品,需-20度条件下保存和运输。
纯度要求:OD260/280在1.6-1.8之间;OD260/230在1.8-2.2之间。
浓度要求:基因组DNA浓度>100ng/ul。
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天津科斯莫生物科技有限公司:
为各位新老客户提供高质,高效的技术服务!
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科斯莫生物相关服务:
MicroRNA相关服务、siRNA干扰、课题整体外包服务、基因克隆服务、慢病毒包装服务、腺病毒服务、稳定细胞株筛选服务、蛋白表达服务、抗体制备服务、DNA与蛋白相互作用研究、噬菌体展示技术服务、cDNA文库构建、干细胞研究、基金申请、标书撰写、专利申请、课题设计等
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详情请联系我们:
电话:19902078713
邮箱:zxm@cosmobiolab.com
科斯莫生物主页:
地址:天津市滨海新区天津国际生物医药联合研究院
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Taq Talk 荧光定量 PCR 系列课程之【如何为 qPCR SNP 基因分型检测设计选择序列】在将目标序列提交给设计工具之前,我们需要对其做些什么?
荧光定量同时存在成为可能,解决了TaqMan-MGB探针最大的不足。 价格相对便宜 上海辉睿生物生物化学部自行开发完成DQ探针,打破国外荧光探针技术垄断,大大降低科研、服务原料成本。 DQ探针应用: 病原体检测 ◆ 使用方法和TaqMan探针一致 ◆ 可以完全替换TaqMan-MGB探针 荧光定量 ◆ 使用方法和TaqMan探针一致 ◆ 可以提高荧光定量的灵敏度 ◆ 可以完全替换TaqMan-MGB探针 多重荧光定量 SNP分型——
light666 miRNA序列比较短小,用探针检测时设计难度比较大,因而许多文章都推荐使用MGB探针。但是不是一定要用MGB探针呢?毕竟MGB比较贵,普通TaqMan探针虽然也不便宜,但比MGB已经便宜不少了。 light666 看了不少文章,用的都是 Taqman MicroRNA assays。请问高手们,这个东西里面的TaqMan探针是MGB的吗?谢谢 bluesteven
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Taqman探针分析法检测SNP
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