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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
EZ-Ladder Prestained Protein Marker (3.3-31KD)
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
200ul
本产品包含了从3.3kD到31 kD共5种纯化的的蓝色预染标准蛋白质和多肽(见下图)。每种蛋白含量约为0.2mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经Tricine SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的5条蓝色蛋白条带。
保存条件:-20℃ 保存,12个月有效,建议分装10ul/管,避免反复冻融。
注意事项:
1. 本蛋白质分子量标准使用前置室温融化后即可上样,请勿使用100℃加热。
2. Tricine SDS-PAGE制备和操作远较常规的SDS-PAGE方法复杂,推荐使用万生昊天的tricine 预制胶(Cat.#: TCH2001-16.5T)。
3. 由于多肽所含的氨基酸数目较少,因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性),则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率,即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
4. 由于SDS-PAGE的图谱上,蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000,因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量,只能根据标准分子量进行估计,推断其是否落入预测的分子量范围。
5. 由于超低分子量多肽(3000及3000以下),极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长,脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久,否则条带会消失。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 使用前置室温融化后即可上样。
2. 上样5-10ul,SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的蓝色条带。
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文献和实验蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色好,上样一定要上足够的量哦。 二.预染蛋白分子量标准 预染蛋白分子量是一些纯化好的蛋白混合物,通过与染料共价耦联,在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验,这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后,以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如,已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处。如果使用预染Marker
【求助】180KD的膜蛋白western转膜条件怎样?(湿转)
zhywang4072 鄙人现在做一180KD的蛋白,之前转PVDF膜用的是100v两个半小时,预染marker转得很漂亮,内参也很不错,但是目标蛋白条带却没有,请教各位大侠,这是什么原因?还有诸位大蛋白转膜时候条件怎样?我用的是湿转,谢谢 wodezxn 我觉得100V2h肯定是足够了,没转上应该是你目的蛋白的问题,可能是蛋白表达量太少或者你提蛋白的时间有问题。 zhibinx2007
的必要条件之一。 总体来说,蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。以下是关于蛋白分子量标准的小叙: 一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准 未染色的蛋白分子量标准是最简单,也是最准确的一种。由于没有附带染料分子或者是标记分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,是精确判断蛋白大小必须的。现在的Marker多数都选用预混和的Marker,方便不同大小的蛋白比较。预混的Marker通常有几条带加倍浓度作为指示,因为混合










