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- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
High Molecular Weight Native Electrophoresis Protein Marker(66-669KD)
- 库存:
100
- 供应商:
上海万生昊天生物技术有限公司
- 规格:
200μL
本产品是4种高纯蛋白质干粉混合物,总蛋白含量为250μg。
具体蛋白含量如下:
| 蛋白名称 | 分子量(kD) | 蛋白来源 | 蛋白含量(μg) |
| Thyroglobulin | 669 | porcine thyroid | 76 |
| Ferritin | 440 | equine spleen | 50 |
| Catalase | 238 | bovine liver | 36 |
| Albumin | 66 | bovine serum | 40 |
组份、储存及运输条件: 注:配制好的蛋白Marker-20℃保存,有效期为12个月。
使用说明:
1. 取200μl非变性蛋白上样缓冲液(1×)加入到蛋白干粉混合物中,彻底混匀融化后,-20℃贮存。
2. 常温融化后,彻底混匀,上样电泳。
注:上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5 μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
3. 电泳结束后,染色,观察结果。
注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量,一般稀释50倍。
注意:
1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE),因为在SDS存在下,含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。
2. 在非变性条件下,蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此,在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中,蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下,确定出蛋白的Rf值,绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。
实验示例:
左1:高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66-669 kD) 5 μl
左2-5:待检样品 各5μl
电泳条件:
5-12% Poly(acrylamide)梯度胶 厚1mm
Tris-甘氨酸不连续系统
150V 稳压电泳
考马斯亮蓝G250染色
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文献和实验谱的Marker不一定每条都能看到的,特别是Mini Cell 。如果侧重大蛋白,那小的可能就已经跑掉了,不是质量不好哦。 ② 高分子量蛋白标准 通常在检测大分子量蛋白经常使用到高分子量蛋白标准, ③ 低分子量蛋白标准 在一般的蛋白电泳当中,更常用的是低蛋白标准分子量,除了有指示蛋白大小的作用以外,有时还可以用作粗略的定量。实验室用在一般蛋白电泳的低分子量蛋白标准中。 在低分子量蛋白标准这里还包括可特别小的蛋白标准,比如30kD以下蛋白
子量蛋白标准 通常在检测大分子量蛋白经常使用到高分子量蛋白标准, ③ 低分子量蛋白标准 在一般的蛋白电泳当中,更常用的是低蛋白标准分子量,除了有指示蛋白大小的作用以外,有时还可以用作粗略的定量。实验室用在一般蛋白电泳的低分子量蛋白标准中。 在低分子量蛋白标准这里还包括可特别小的蛋白标准,比如30kD以下蛋白或者多肽的分离辨别。其中GE的从2kD到16kD之间有6条带的蛋白标准挺不错,另外提醒一句,特别小的蛋白Marker条带如果要显色
with a marker pen. 9. Carefully remove the comb from the stacking gel, remove any spacer from the bottom of the gel cassette, andassemble the cassette in the electrophoresis tank. Fill the top reservoir with electrophoresis buffer ensuring that the buffer fully











