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天津科斯莫生物技术有限公司
- 服务名称:
亚克隆
原理:
亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆,其目的在于对目的DNA进行进一步分析,或者进行重组改造等。
服务内容:
1. 将含有目的基因的质粒采用双酶切的方法克隆至商品化的表达载体或改造后的特殊载体上。
2. 将载体上的目的基因进行PCR扩增并加入特定酶切位点后,克隆至商品化的表达载体或改造后的特殊载体上。
3. 利用PCR、酶切等手段对已有载体进行改造。
服务流程:
1. 目的DNA片段和载体的制备(目的基因从另外的基因大片段或质粒载体中获得);
2. 目的DNA片段和载体的连接;
3. 连接产物的转化;
4. 重组子筛选;
5. 重组质粒纯化。
相关要求:
客户提供待改建质粒。
最终结果:
1. 纯化后重组质粒;
2. 具体试验流程(包括:实验步骤;主要仪器及试剂说明(含仪器厂家、型号;试剂厂家、批号));
3. 原始数据及相关结果分析。
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MicroRNA相关服务、siRNA干扰、课题整体外包服务、基因克隆服务、慢病毒包装服务、腺病毒服务、稳定细胞株筛选服务、蛋白表达服务、抗体制备服务、DNA与蛋白相互作用研究、噬菌体展示技术服务、cDNA文库构建、干细胞研究、基金申请、标书撰写、专利申请、课题设计等
电话:19902078713
邮箱:zxm@cosmobiolab.com
科斯莫生物主页:
地址:天津市滨海新区天津国际生物医药联合研究院
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文献和实验一、目的与原理 限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶,该类酶是体外剪切基因片段的重要工具。实验主要通过EcoR Ⅰ,Hind Ⅲ两种限制性内切酶对λ DNA的单切酶、双切酶及部分酶切的操作,掌握内切酶的实验操作技术。 二、材料与试剂 1.材料:λDNA 2.仪器: 离心机,恒温水浴,取液器,电泳仪,电泳槽,紫外观测仪 3.试剂 EcoRI及缓冲液,HindIII及缓冲液,λDNA,TAE缓冲液 三、操作步骤: EcoRI
一、目的与原理 限制性内切酶是一类能识别双链DNA分子中特异核苷酸序列的DNA水解酶,该类酶是体外剪切基因片段的重要工具。实验主要通过EcoR Ⅰ,Hind Ⅲ两种限制性内切酶对λ DNA的单切酶、双切酶及部分酶切的操作,掌握内切酶的实验操作技术。 二、材料与试剂 1.材料:λDNA 2.仪器: 离心机,恒温水浴,取液器,电泳仪,电泳槽,紫外观测仪 3.试剂 EcoRI及缓冲液,HindIII及缓冲液,λDNA,TAE缓冲液 三、操作步骤: EcoRI
所谓亚克隆就是对已经获得的目的DNA片段进行重新克隆,其目的在于对目的DNA进行进一步分析,或者进行重组改造等。 亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。 一、试剂准备 1.LB液体培养基:胰化蛋白胨(细菌培养用)10g,酵母提取物(细菌培养用) 5g,NaCl 10g,加ddH2O 至1000ml,完全溶解,分装小瓶,15lbf/in2高压灭菌20min
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









