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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
60
- 英文名:
Mach1-T1 Chemically Competent Cell
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
- 规格:
100μl/支
Mach1-T1
Mach1-T1 Chemically Competent Cell 产品说明书产品规格(CAT#: KL1015)
Mach1-T1: 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
基因型
F- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR(rK- mK+) ΔrecA1398 endA1 tonA
产品说明
Mach1-T1菌株由野生型non-K-12 E. Coli W菌株改造而来,是目前生长速度较快的感受态细胞之一,在平板上 8h可见克隆,缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒DNA的产量和质量;重组酶缺陷型(recA1398)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA的稳定性;lacZΔM15的存在使Mach1-T1可用于蓝、白斑筛选;tonA突变赋予Mach1-T1菌株对噬菌体T1和T5的抗性。Mach1-T1感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>109cfu/μg DNA。
操作方法
1. Mach1-T1感受态细胞从
2.
3.向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后
4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于
注意事项
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
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文献和实验由江上不二夫等从米曲霉(Aspergillus oryz-ae)的高峰淀粉酶中分离提纯的、具有鸟嘌呤特异性的核糖核酸酶,缩写为 RNA酶 T1 . EC3. 1. 4. 8。分解 RNA时首先可逆地切断与 3′ -鸟苷酸残基相邻的核苷酸间磷酸二酯键,中间形成具 2′, 3′ -cGMP和以 2′, 3′ -cGMP为末端的寡核苷酸,随之进行不可逆的解而产生以 3′ -GMP和以 3′ -GMP为末端的寡核苷酸。自从 R. W. Holley等人用此酶决定 tRNA的核苷酸排列以来,它成为
RNase A/T1 mapping provides a sensitive and quantitative method of expression analysis of known gene sequences. It differs from primer-derived analyses such as primer extension and reverse transcriptase-PCR by the use of a probe
相关专题 RNA酶T1为一内切核糖核酸酶 。它特异地作用于鸟嘌呤核苷酸3"端磷酸并切割与相邻核苷酸相连的磷酸二酯键。反应的终产物为鸟嘌呤核苷3"磷酸及末端带鸟嘌呤核苷3"磷酸的寡核苷酸(Davidson 1972)。 用途 去除DNA-RNA杂交体中未杂交的RNA区。
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