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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
26
- 英文名:
Antibiotic Agar No.1
- CAS号:
咨询在线客服
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
250g
产品名称:抗生素检定培养基1号(低PH)说明书
英文名称:Antibiotic Agar No.1
产品规格:250g
产品用途:用于磺苄青霉素效价测定用途:用于磺苄青霉素效价测定。成分(g/L)蛋白胨 5.0牛肉浸粉 3.0磷酸氢二钾 3.0琼脂 15.0pH值6.5- 6.6 25℃用法称取本品 26.0g,加热搅拌溶解于 1000ml 蒸馏水中,116℃高压灭菌 20 分钟,备用。
产品图片:
菌液制备与稀释:
1.抗生素检定培养基1号(低PH)说明书金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌
挑取四代以内(含四代)上述菌种的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基中,30~35℃培养18~24h,使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释,制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度:通常情况下为10-6~10-7、枯草芽孢杆菌10-5~10-6)
2. 白色念珠菌
挑取四代以内(含四代)的白色念珠菌新鲜培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中,经20~25℃培养2~3天;使用pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释,制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度:通常情况下为10-6~10-7)
3. 黑曲霉
挑取四代以内(含四代)的新鲜培养物至沙氏葡萄糖琼脂培养基斜面中,经20~25℃培养5~7天(生长大量黑色菌丝),加入5ml含0.05%聚山梨脂80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液,将孢子洗脱。使用含0.05%聚山梨脂80的pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液或含0.05%聚山梨脂80的0.9%氯化钠溶液进行十倍稀释,制成每1ml含小于100cfu的菌悬液。
(稀释梯度:通常情况下为10-5~10-6,因菌丝数量不同,可能有误差)
培养基制备:
被检培养基:称取培养基30.0g于1000ml纯化水中,微温溶解,分装试管,121℃高压灭菌15分钟,冷却,备用。
另准备胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基进行稀释菌悬液计数,培养基灭菌后置于44.5℃水浴保温待用。
抗生素检定培养基1号(低PH)说明书【实验方法】
1. 培养基阳性组:取稀释后的各试验菌悬液1ml分别加于预先制备的试管培养基中,每种细菌接种两支试管。同时分别取1ml菌悬液加于无菌空平皿中,用于计数,每种细菌做两个平板。
2. 培养基阴性组:即空白对照,即不添加菌液。
3. 接种量计数:步骤1中的平皿中,细菌倾注胰酪大豆胨琼脂培养基,霉菌和白色念珠菌倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基。同时每种培养基做1个空白。
4. 培养条件:
无菌检查:20~25℃培养14天或直至出现浑浊(不超过14天)
MPN计数:30~35℃培养箱中培养3天
控制菌检查:30~35℃培养箱中培养18~24小时
倾注计数用的的胰酪大豆胨琼脂培养基平板置30~35℃培养箱中培养3天
倾注计数用的沙氏葡萄糖琼脂培养基平板置20~25℃培养箱中培养3~5天
血小板反应蛋白解整合素金属肽酶9Elisa检测试剂盒英文名称:ADAMTS9 ELISA Kit英文缩写:ADAMTS9
血小板生长因子Elisa检测试剂盒英文名称:PGF ELISA Kit英文缩写:PGF
血小板生成素Elisa检测试剂盒英文名称:TPO ELISA Kit英文缩写:TPO
血小板因子3Elisa检测试剂盒英文名称:PF-3 ELISA Kit英文缩写:PF-3
血小板因子4Elisa检测试剂盒英文名称:PF4 ELISA Kit英文缩写:PF4
血小板因子4Elisa检测试剂盒英文名称:PF-4/CXCL4 ELISA Kit英文缩写:PF-4/CXCL4
血小板因子4V1Elisa检测试剂盒英文名称:PF4V1 ELISA Kit英文缩写:PF4V1
血小板型磷酸果糖激酶Elisa检测试剂盒英文名称:PFKP ELISA Kit英文缩写:PFKP
Hoechst 33258 荧光染料33258 25 mg
Hoechst 33258 荧光染料33258 100 mg
Hoechst 33258 solution Hoechst 33258染色液10 mL
Hoechst 33258 solution Hoechst 33258染色液50 mL
Hoechst 33342 荧光染料3334225 mg
Hoechst 33342 荧光染料33342100 mg
Hoechst 33342 solution Hoechst 33342染色液10 mL
Hoechst 33342 solution Hoechst 33342染色液50 mL
BAPTA, AM 胞内钙掩蔽BAPTA, AM 25 mg
BAPTA, tetrapotassium salt BAPTA四钾盐 1g
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操作步骤:
1、抗生素检定培养基1号(低PH)说明书按、 SN 标准、 FDA 标准或其它方法制备样品液;
2、取 25 克样品液加入 225ml mEC 肉汤或 mTSB 肉汤中, 37 ℃ 增菌培养 18-24 小时;
3 、用 3mm 接种环取 1 环增菌液,划线接种到 O157 菌显色培养基上,做 2 个平板;
4 、 37 ℃培养 18-24h , O157:H7 菌显紫色 , 大肠杆菌和大肠菌群显暗蓝色, 其它细菌显黄色或无色;
5 、对典型菌落可做 O157:H7 菌血清学试验和全套生化试验。
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文献和实验. 质粒拷贝数低: 由于使用低拷贝数载体引起的质粒 DNA 提取量低,可更换具有相同功能的高拷贝数载体。 11. 菌体中无质粒: 有些质粒本身不能在某些菌种中稳定存在,经多次转接后有可能造成质粒丢失。例如,柯斯质粒在大肠杆菌中长期保存不稳定,因此不要频繁转接,每次接种时应接种单菌落。另外,检查筛选用抗生素使用浓度是否正确。 12. 碱裂解不充分: 使用过多菌体培养液,会导致菌体裂解不充分,可减少菌体用量或增加(以天根生化的质粒小提试剂盒中的溶剂配置为例)溶液 P1、P2 和 P3 的用量
广泛、生长迅速和体积大小等特点,细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到;受感染的培养物通常会变得浑浊,有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的 pH 值突然下降的情况。在低倍显微镜下,细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间,在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的 293 细胞被大肠杆菌污染。 酵母 酵母是真菌界中的单细胞真核微生物,大小从几微米(常见)到 40 µm(罕见)不等。与细菌污染一样,被酵母
0.1~0.2个单位。 (8) 在细胞培养过程中,建议不加或加少量的抗生素,如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。 (9) 建议用1N HCl或1N NaOH来调节培养基的pH,因为用碳酸氢钠调pH值对培养液的渗透压影响比较大。如下图所示: 图2 MEM SLM(SLM120)在相同pH值时所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压 图3 199(MD502)在相同pH值所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压 4、灭菌方法 培养基的灭菌
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