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东曹
TSKgel FcR-ⅢA-NPR 是一款将重组人FcγⅢA作为配基,键合到无孔的亲水性聚合物基质上的高性能亲和色谱柱,该色谱柱可以识别抗体Fc区域的N-糖链结构,根据ADCC生物学活性来实现抗体分离。
●主要用途:
抗体、Fc融合蛋白的分析;
细胞株筛选、培养条件优化、上游生产工艺管理、产品批次质量监控
●产品基本参数:
| 填料基质: | 亲水性无孔聚合物 |
| 粒径: | 5 μm |
| 配基: | 重组人FcγRⅢA |
| 色谱柱尺寸: | 4.6 mm I.D. X 7.5 cm |
| 色谱柱材质: | PEEK |
●分离原理:
抗体Fc区的糖链结构影响抗体活性,这是导致药品质量差异的重要原因。
TSKgel FcR-ⅢA-NPR色谱柱可以识别不同糖链结构,根据活性来分离抗体。

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文献和实验于滴定架上,柱底垫一圆形尼龙纱,出水口接一乳胶或塑料管并关闭开关。②将0.1mol/l ,pH7.4PB沿玻璃棒倒入柱中至1/4高度,再倒入经预处理并以同上缓冲液调成稀糊状的a-50。等a-50。等a-50凝胶沉降2~3cm高时,开启出水口螺旋夹,控制流速1ml/min,同时连续倒入糊状a-50凝胶至所需高度。③关闭出水口,待a-50凝胶完全沉降后,柱面放一圆形滤纸片,以橡皮塞塞紧柱上口。通过插入橡皮塞之针头及所连接的乳胶或塑料管与洗脱液瓶相连接。(3)平衡启开出水口螺旋夹,控制流速12~14滴
【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。
[img][/img]Protein A 柱之进化 Protein A是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质,能特异性地与人和哺乳动物抗体(主要是IgG)的Fc区结合。因而,将Protein A 与琼脂糖凝胶以一定的方式结合,可制备用于抗体纯化的亲和填料。 早期的Protein A柱结合的都是天然Protein A。天然Protein A由5个IgG结合域和其它未知功能的非Fc结合域组成,分子量约42KD,结构如图1所示。这种柱子对IgG的亲和能力很强,可以吸附大量的lgG。但同时,天然
」进行分离。 每种层析技术各有优势和特点,「组团出道」才能到达最佳的纯化效果。希望通过这份密卷,能够加速大家的纯化之路,由凝胶过滤、标签蛋白纯化、抗体纯化、离子交换、层析空柱等内容构成。 绝招一:凝胶过滤预装柱堵了、超压的处理方式 可能原因:缓冲液或样品未进行过滤、蛋白沉淀或杂质残留、清洗不及时等引起层析柱滤膜堵塞;流速过快、流动相粘度(如乙醇等)过高、温度过低。 建议处理方法:首先卸柱子,确定是系统还是柱子堵了。如果是柱子堵了:参考说明书 CIP 操作进行清洁;更换层析柱顶端滤膜
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