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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
原代细胞
- 细胞类型:
见说明书
- 肿瘤类型:
见文献
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 库存:
5×105
- 生长状态:
良好
- 年限:
永久
- 运输方式:
新鲜/干冰
- 器官来源:
神经
- 是否是肿瘤细胞:
见文献
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
见文献
- 物种来源:
大鼠
- 相关疾病:
见文献
- 组织来源:
神经
- 规格:
5×105
细胞简介:
星形胶质细胞是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞,也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术(银染色)显示此类胶质细胞呈星形,从胞体发出许多长而分支的突起,伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间,起支持和分隔神经细胞的作用。星形胶质细胞还具有营养作用,协助神经元的代谢,星形胶质细胞通过血管周足和突起连接毛细血管与神经元,对神经元起到运输营养物质和排除代谢产物的作用。
本公司生产的大鼠脊髓星形胶质细胞采用酶解法制备而来,细胞总量约为5×105/T25方瓶,GFAP免疫荧光染色呈阳性,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息:
我们推荐使用康朗生物研制的大鼠脊髓星形胶质细胞专用完全培养液(产品编号:KLR5030-5)作为体外培养大鼠脊髓星形胶质细胞培养基。
细胞培养过程中,传代是非常重要的环节,若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害,原代细胞因其培养难度高且传代次数有限,细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验,总结出一套细胞消化的方法,有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家:1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸(PLL,货号KL0403)或纤维粘连蛋白(BPF,货号KL8248)包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基,胰酶/EDTA消化液(T/E,货号KL0103),胰胰中和液(TNS,货号KL0113)和不含钙镁离子的DPBS(货号KL0303)加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例,向培养瓶中加入8mlDPBS,然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间,准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清(FBS,货号KL0500)。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中(一小部分细胞已消化下来),将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟(此时培养瓶中没有液体)。
8. 在孵化结束时,轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液,将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶,以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功,细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟,然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数,然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反,原代细胞是非常敏感的细胞,需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长,需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如,内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别,因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分,以支持细胞的生长。但对于原代细胞,高血清水平可导致细胞分化,或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验浅谈 RNA 测序:从阿尔茨海默症相关星形胶质细胞的发现说起
非神经元细胞在阿尔茨海默症(Alzheimer's Disease, AD)病理进展中的作用尚未完全阐明。在一项美国麻省理工学院和哈佛大学广泛研究所合作的研究中,研究人员通过单核 RNA 测序(single-nucleus RNA sequencing)技术,鉴定出了 AD 小鼠模型中与疾病相关的新型星形胶质细胞,为阿尔茨海默症的病理进展提供了细胞基础。该研究发现,与疾病相关的星形胶质细胞出现在阿尔茨海默症的早期阶段,并随着疾病的发展而增加。同时发现类似的星形胶质细胞也在衰老的野生型小鼠和衰老
星形胶质细胞是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞,也是胶质细胞中体积最大的一种。用经典的金属浸镀技术 ( 银染色 ) 显示此类胶质细胞呈星形,从胞体发出许多长而分支的突起,伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间,起支持和分隔神经细胞的作用。细胞突起的末端常膨大形成脚板 (footplate) 或称终足 (endfoot) ,有些脚板贴附在邻近的毛细血管壁上 ( 图 1-2) ,因此这些脚板又被称为血管足或血管周足,靠近脑脊髓表面的脚板则附着在软膜
1,我取脑的时候是用双镊,先用一把夹住头部,另一把在人状缝下面撕开,要特别小心,别弄出血来,因为出血的话取出的脑组织含血块就会比较多,离心的时候可以看出来,不知各位同仁有没有更好的方法。 2,尽量去除脑膜和血管,PBS清洗干净,胰酶消化37度10-15分钟,消化中止按每10ml胰酶加1ml血清。 3,玻璃培养瓶差速30-40min,过滤75-100um滤网,种植,其实我不大看细胞密度,感觉差不多就好了,呵呵 。 4,纯化的时候如果是在第12天的时候单纯震荡12-18h的话好象
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