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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
原代细胞
- 细胞类型:
见说明书
- 肿瘤类型:
见文献
- 供应商:
上海康朗生物科技有限公司
- 库存:
5×105
- 生长状态:
良好
- 年限:
永久
- 运输方式:
新鲜/干冰
- 器官来源:
肝脏
- 是否是肿瘤细胞:
见文献
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
见文献
- 物种来源:
大鼠
- 相关疾病:
见文献
- 组织来源:
肝脏
- 规格:
5×105
细胞简介:
肝血窦是相邻肝板之间的腔隙,是一种特殊的毛细血管。肝血窦的窦壁由肝细胞的细胞膜构成,故肝血窦的通透性较大,有利于肝细胞与血流之间进行物质交换。在电镜下观察,肝血窦内皮细胞与肝细胞之间有一狭窄间隙,称窦周隙(Disse腔)。肝窦内皮细胞是肝脏非实质细胞的主要细胞群,由肝窦内皮细胞构成的肝窦壁是全身毛细血管壁中唯一缺乏基膜的毛细血管窗孔,足肝窦内皮细胞最具特征性的结构。肝窦内皮细胞在调节肝窦血流与周围组织的物质交换中起有效的中枢性的作用,因此肝窦内皮细胞对于维持正常的肝功能起十分重要的作用。同时肝窦内皮细胞在肝脏的生理病理过程中发挥着诸多的重要功能。
本公司生产的小鼠肝窦内皮细胞采用体外多步灌注和密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×105/T25方瓶,Stabilin-2呈阳性,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息:
我们推荐使用康朗生物研制的小鼠肝窦内皮细胞专用完全培养液(产品编号:KLM6004-6)作为体外培养小鼠肝窦内皮细胞的培养基。
细胞培养过程中,传代是非常重要的环节,若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害,原代细胞因其培养难度高且传代次数有限,细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验,总结出一套细胞消化的方法,有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家:1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸(PLL,货号KL0403)或纤维粘连蛋白(BPF,货号KL8248)包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基,胰酶/EDTA消化液(T/E,货号KL0103),胰胰中和液(TNS,货号KL0113)和不含钙镁离子的DPBS(货号KL0303)加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例,向培养瓶中加入8mlDPBS,然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间,准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清(FBS,货号KL0500)。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中(一小部分细胞已消化下来),将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟(此时培养瓶中没有液体)。
8. 在孵化结束时,轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液,将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶,以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功,细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟,然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数,然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反,原代细胞是非常敏感的细胞,需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长,需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如,内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别,因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分,以支持细胞的生长。但对于原代细胞,高血清水平可导致细胞分化,或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验。 (2)Miz1 缺失促进核因子(NF-κB)激活 接着,研究者对 Miz1F/F 和 Miz1∆hep 两组小鼠样本进行了单细胞测序,共获得 24,802 个细胞,注释细胞类型主要包括肝实质细胞(2365 个,9.5% total cell),中性粒细胞,内皮细胞,树突状细胞,B 细胞,T 细胞和巨噬细胞(4277 个,17.2% total cell)。对肝细胞群体进一步进行 subCluster,拟时序分析,差异基因表达分析发现,Miz1∆hep 小鼠产生了独特的肿瘤肝细胞群体,该群细胞高度表达 NF
的HCC的敏感性增加。 2. Miz1缺失促进核因子(NF-κB)激活 接着,研究者对Miz1F/F和Miz1∆hep两组小鼠样本进行了单细胞测序,共获得24,802个细胞,注释细胞类型主要包括肝实质细胞(2365个,9.5% total cell),中性粒细胞,内皮细胞,树突状细胞,B 细胞,T细胞和巨噬细胞(4277个,17.2% total cell)。对肝细胞群体进一步进行subCluster,拟时序分析,差异基因表达分析发现,Miz1∆hep小鼠产生了独特的肿瘤肝细胞群体,该群细胞高度
内涵物:肝细胞内有糖原、脂滴、色素等内涵物,它们的含量因机体的生理和病理状况的不同而异。进食后糖原增多,饥饿时糖原减少。正常肝细胞内脂滴少,肝病时脂滴多。肝细胞胞质的色素有胆红素、含铁血黄素、脂褐素等,它们也可以贮存在溶酶体内,脂褐素的含量随机体年龄的增长而增多。 2.肝血窦 肝血窦(hepatic sinusoid)位于肝板之间,互相吻合成网状管道。血窦腔大而不规则,血液从肝小叶的周边经血窦流向中央,汇入中央静脉。血窦壁由内皮细胞组成,窦腔内有定居于肝内的巨噬细胞和大颗粒淋巴
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