- ¥8560
- 康朗生物
- KLH1048
- 上海
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
原代细胞
- 细胞类型：
见说明书
- 肿瘤类型：
见文献
- 供应商：
上海康朗生物科技有限公司
- 库存：
5×105
- 生长状态：
良好
- 年限：
永久
- 运输方式：
新鲜/干冰
- 器官来源：
泌尿系统
- 是否是肿瘤细胞：
见文献
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
见文献
- 物种来源：
人
- 相关疾病：
见文献
- 组织来源：
泌尿系统
- 规格：
5×105
细胞简介：
肾小管上皮细胞对肾功能的发挥起着重要作用。它们几乎能重吸收肾小球滤过液中所有的葡萄糖和氨基酸，并使其它非营养物质排泄到尿液中。肾小管上皮细胞能产生包括细胞因子和趋化因子在内的炎性介质，并通过产生IL-8从而影响和指导白细胞的分化来积极参与急性炎症过程。在肾脏移植后或新月体肾炎的炎症过程中，肾小管上皮细胞表达IL-2 α受体和II类MHC抗原，这表明它们参与肾脏免疫系统损伤的发病机理。
本公司生产的人肾小管上皮细胞采用酶解法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，CK-18、CK-19呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基信息：
我们推荐使用康朗生物研制的人肾小管上皮细胞专用完全培养液（产品编号：KLH4048-5）作为体外培养人肾小管上皮细胞的培养基。
细胞培养过程中，传代是非常重要的环节，若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害，原代细胞因其培养难度高且传代次数有限，细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。康朗生物根据其丰富的原代细胞培养经验，总结出一套细胞消化的方法，有效降低了消化步骤对细胞的操作。现分享给大家：1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代培养。
2. 提前准备好多聚赖氨酸（PLL，货号KL0403）或纤维粘连蛋白（BPF，货号KL8248）包被好的培养瓶。
3. 将完全培养基，胰酶/EDTA消化液（T/E，货号KL0103），胰胰中和液（TNS，货号KL0113）和不含钙镁离子的DPBS（货号KL0303）加热至室温。我们不推荐用37度水浴加热试剂和培养基。
4. 用DPBS冲洗细胞。
5. 以T-75培养瓶为例，向培养瓶中加入8mlDPBS，然后加入2ml胰酶/EDTA消化液。轻轻摇动培养瓶保证细胞被胰酶/EDTA消化液完全覆盖。将培养瓶置于37度培养箱1-2分钟直到细胞变圆。在显微镜下观察细胞形态变化。
6. 在消化期间，准备一支50ml离心管加入5ml胎牛血清（FBS，货号KL0500）。
7. 将胰酶/EDTA消化液从培养瓶中吸出至50ml离心管中（一小部分细胞已消化下来），将培养瓶继续置于37度培养箱中1-2分钟（此时培养瓶中没有液体）。
8. 在孵化结束时，轻轻拍打培养瓶侧面使细胞脱离表面。在显微镜下检查以确保所有细胞已脱离。
9. 向培养瓶中加入5ml胰酶中和液，将消化后的细胞转移至50ml离心管中。再加入5ml胰酶中和液冲洗培养瓶，以保证所有细胞被收集。
10. 在显微镜下观察剩余细胞数量以确定是否收集成功，细胞数量应小于5%。
11. 以1000转/分离心收取的细胞悬液5分钟，然后在培养基中重悬细胞。
12. 细胞计数，然后将细胞以推荐的细胞密度接种在包被好的培养瓶中。
原代细胞、细胞系与细胞株的区别
与细胞系相反，原代细胞是非常敏感的细胞，需要传统培养基之外的额外营养物质。为了优化原代细胞的存活和生长，需要针对每种细胞类型选择特定的培养基。例如，内皮细胞对营养的需求与上皮细胞或神经元有很大区别，因此需要特制的内皮细胞培养基。而传统的细胞培养基依靠血清提供生长因子、激素、脂质和其他的未知组分，以支持细胞的生长。但对于原代细胞，高血清水平可导致细胞分化，或促进污染细胞如成纤维细胞的生长。
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文献和实验本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总 结，请分享！ 取材：1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法)： ①取 Wistar 大鼠断颈法处死，立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。 ②将大鼠转移入超净工作台，取腰部切口迅速取出肾脏，置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。 ③取皮质置于80目筛网上，剪碎成1-2mm3大小组织块，网下放盛有少量生理盐水的培养皿。 ④用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。 ⑤收集 80 目网下液体转移至 100
本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总 结，请分享！ 取材：1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法)： ①取 Wistar 大鼠断颈法处死，立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。 ②将大鼠转移入超净工作台，取腰部切口迅速取出肾脏，置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。 ③取皮质置于80目筛网上，剪碎成1-2mm3大小组织块，网下放盛有少量生理盐水的培养皿。 ④用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。 ⑤收集 80 目网下液体转移至 100
急、慢性排异反应的细胞学变化可从尿液涂片中反映出来。所以对肾移植患者在连续定期检查尿液。涂片中可出现多量淋巴细胞、肾小管上皮细胞和移行上皮细胞。 1.淋巴细胞：涂片内见两种淋巴细胞，一种为小淋巴细胞；另一种体积较大，约为小淋巴细胞的2-3倍。核呈圆形或不规则形，核缘不整齐呈脑回状；有的核边清楚，染色质疏松，见1-2个核仁有的淋巴细胞核周有亮晕。此类细胞用甲基绿派洛宁染色时，胞质呈红色，含红色颗粒，核染成绿色或紫蓝色，称嗜派洛宁淋巴细胞。若嗜派洛宁细胞数量急剧时，预示急性排异
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