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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Proteinase K, Tritirachium album
- CAS号:
539480-100MG
- 供应商:
上海研卉生物科技有限公司
- 规格:
100mg
Proteinase K, Tritirachium album
-
CAS号 39450-01-6
产品描述
General description
Serine protease that exhibits strong proteolytic activity on a wide variety of denatured and native proteins of high molecular weight. Because of its rapid proteolytic inactivation of endogenous nucleases, it can be used for isolation of mRNA and high molecular weight DNA. Preferentially cleaves bonds next to the carbonyl group of N-substituted hydrophobic, aliphatic, and aromatic amino acids. Inhibited by DFP, Hg2+, and PMSF. Not inactivated by metal chelators, sulfhydryl reagents, TLCK, or TPCK.
Other Notes
Watazu, Y., et al. 1993. J. Lab. Clin. Anal. 7, 81.
Lebherz, H.G., et al. 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.
Reconstitution
Following reconstitution, store in the refrigerator (4°C). Stock solutions prepared in 50 mM Tris-HCl, 2 mM calcium acetate, pH 8.0 are stable for up to 1 year at 4°C.
Unit Definition
One mAnson unit is defined as the amount of enzyme that will liberate 1.0 µmol of Folin-positive amino acids (calculated as tyrosine) per min at 37°C, pH 7.5.
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文献和实验蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,用于生物样品中蛋白质的一般降解。从林伯氏白色念球菌(tritirachium album limber)中纯化得到。该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。所以,蛋白酶k消化过程中通常加入edta(以抑制依赖于mg2+的核酸酶的作用
蛋白酶 K,威力巨大的广谱蛋白酶,95C 加热10 分钟,则完全失活。数年前首次使用它,是替代 DEPC 处理 RNA 抽提用的离心管和枪头,效果不错;后来又用于处理 RNase-Free的水,效果也是一级棒。从此就再也不用 DEPC 了。现在将它的细节公开,与大家分享。 配制 RNA 裂解试剂时,直接用灭菌的双蒸水配制,最后,加入蛋白酶 K 至终浓度 1ug/ml。轻轻混匀,室温放置 15 分钟后即可。枪头及离心管去除 RNase:先将枪头及离心管清洗干净后,移入预先混好的含 1ug
编者按: 当我们屏着呼吸使用致癌的DEPC时,是否想过用一种既安全又省钱方法替代DEPC?看过本文,你一定会感慨作者的探索精神。其实,在生物吧,这样的探索还有很多。如果你嫌找得麻烦,那就先看看“牛人强文” 吧! 蛋白酶 K 的妙用,我曾经在别的论坛发表。坦率地说,蛋白酶 K 的这个用途,是我的得意之作之最。不是因为该发现有什么创新,而是因为它的实用性。当别人还在讨论 DEPC
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