Human Chitinase 3-like 1 Valuk

Human Chitinase 3-like 1 Valukine ELISA Kit

适用于定量检测天然和重组人 Chitinase 3-like 1 的浓度
科研专用，不可用于临床诊断

背景
几丁质酶3样蛋白1 (CHI3L1) 又称YKL-40或人软骨糖蛋白39（HCGP39），是糖基
水解酶18家族的一种39 kDa糖蛋白成员 (1-4)。CHI3L1最初被鉴定为由培养的关节软骨
细胞、滑膜细胞和活化的单核细胞来源的巨噬细胞分泌，但它也由中性粒细胞、内皮细胞、
血管平滑肌细胞和一些癌细胞分泌(1, 2, 5-7)。人类CHI3L1 cDNA编码383个氨基酸(aa)，
包括一个21 aa信号序列和一个含有两个分子内二硫化物的362 aa成熟区(3)。成熟人
CHI3L1与小鼠、大鼠、犬、牛、猪和马CHI3L1的aa序列同源性分别为73%、80%、82%、
83%、86%和87%。人类CHI3L1和CHI3L2具有43%的aa序列同源性。两者都不显示几丁
质酶活性，但都结合几丁质，因此被称为几丁质凝集素(1-4)。CHI3L1可以与肝素结合，
可能是硫酸乙酰肝素(3, 7)。已经发现它可以增强细胞粘附，促进细胞信号传导、增殖和
肿瘤血管生成(4, 6-9)。在某些以炎症和结缔组织重塑为特征的情况下，血清CHI3L1水平
升高，如关节炎、慢性阻塞性肺病、糖尿病、心血管疾病、炎症性肠病和肝硬化(1, 9-12)。
可增加血清CHI3L1浓度的单核苷酸多态性与儿童哮喘的高风险相关(13)。CHI3L1在胶质
母细胞瘤、粘液样软骨肉瘤、黑色素瘤和乳腺癌、甲状腺癌、结肠癌、肺癌、肾癌和卵巢
癌中经常上调(9)。在哮喘和癌症中，血清CHI3L1浓度与预后相关(9, 14, 15)。

检测原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人Chitinase 3-like 1抗体包被于微孔板上，样品
和标准品中的人Chitinase 3-like 1会与固定在板上的抗体结合，游离的成分被洗去；接着
加入生物素化的抗人Chitinase 3-like 1检测抗体进行孵育，洗涤去除未结合的物质后，加
入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶（Streptavidin-HRP）孵育。洗涤去除未结合的试剂
后，加入TMB底物溶液（显色剂）。溶液颜色与结合的目标蛋白成正比；加入终止液；
用酶标仪测定吸光度。
B. 检测局限
 仅供科研使用，不可用于体外诊断；
 该试剂盒适用于细胞培养上清样本和人血清样本；
 请在试剂盒有效期内使用；
 不同试剂盒及不同批号试剂盒的组分不能混用；
 样本值若大于标准曲线的最高值，应将样本用标准品稀释液（1×）稀释后重新检测；
 检测结果的不同可由多种因素引起，包括实验人员的操作、移液器的使用方式、洗板
技术、反应时间或温度、试剂盒的效期等

B. 回收率
在细胞培养基样本中掺入检测范围内不同水平的人Chitinase 3-like 1，测定其回收率。回
收率范围在85.0-97.4%，平均回收率在90.3%。
在人血清样本中掺入检测范围内不同水平的人Chitinase 3-like 1，测定其回收率。回收率
范围在88.1-118.6%，平均回收率在104.4%。
C. 灵敏度
人Chitinase 3-like 1的最低可测剂量（MDD）一般小于3.7 pg/mL。
MDD是根据20个重复的零标准品孔的吸光度值的平均值加两倍标准差计算得到的相对应
浓度。
D. 校正
此ELISA试剂盒经由R&D Systems生产的NS0细胞表达的高纯度重组人Chitinase 3-like
1蛋白所校正。