Easy Digestion T载体(pED-T)

特别提示：包括Easy Digestion T载体(pED-T)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Easy Digestion T载体(pED-T)
英文名称：Easy Digestion T-Vector(pED-T)
产品货号：JN0102
产品规格：20次

  本品是一种PCR产物高效TA克隆的专用T载 体，它由pTZ19R载体改造而成。Easy Digestion T-vector在插入位点 两端特别设计了两个BamH I位点，使插入片段可以用BamH I单酶切检测及亚克隆，另外还可以使用非常廉价和高效的EcoR I与Hind III双 酶切检测及亚克隆。
  传统T载体在进行连接时的操作程序是：载体、片段、T4 DNA Ligase Buffer、T4 DNA Ligase。本制品是在传统模式上将除了插入片段的各成分进行预混，并使其在稳定性、转化子数目、阳性率方面不低于传统模式，使用时只需加入插入片段即可，大大简化了操作过程，降低了配制连接体系过程中的误差和污染率，节省了时间。

产品组成：

组份	规格
pED-T vector（25 ng/μl）	100μl
T4 DNA Ligase	30ul
2×Quick Ligation Buffer	500ul
10×Ligation Buffer	500ul
Control Insert（50 ng/μl）	10ul
附赠
2×Fast Taq MasterMix (快速上样型)	1ml×2
2×Fast Taq MasterMix (快速上样型)	1ml
DNA Ladder 2000 Plus	100ul

产品特点：
1、15分钟快速连接：
· 随酶提供独特配方的2×快速及10×普通T4 DNA Ligation Buffer。
· 使用2×快速Buffer在室温(25℃)下，仅需15分钟即可完成连接反应。
2、自带超快PCR鉴定2×Fast Taq MasterMix及DNA Marker：
2×Fast Taq MasterMix (Quick Load型)已含有PCR反应所需的快速型PCR聚合 酶、dNTP混合物、MgCl2、上样染料以及反应缓冲液预先，使用时只需再加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应。其扩增速度为普通Taq酶的数倍，因此可大幅度缩短PCR鉴定过程所需要的时间，试剂盒自带预混1×Loading Buffer的DNA Ladder 2000 Plus，能满足绝大部分PCR产物电泳的需要。




质量控制：
· Control Insert克隆后的白色菌落中，有90%以上 含有Insert DNA片段。
· Control Insert经克隆后，经测序确认“T” 突出的 存在。

除了Easy Digestion T载体(pED-T),，我公司还供应以下相关产品：



名称：平末端DNA加A试剂盒
货号：BTN60105
规格：50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有dATP 存在的情况下，在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴，使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下：


产品特点：
1. 简单，2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。

试剂盒组成：

成分	规格
Taq DNA polymerase(5U/μL)	50μl
2×Tailing Buffer	1.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：反应前纯化处理：
用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/氯*抽提或Proteinase K处理)，否则它们将在加A反应时，切除掉加上的A尾巴，干扰反应。可以采取胶回收和酚/氯*抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE中，终浓度以0.1μg/μL为宜。
二：加A反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中，分别加入下列成分：

回收的DNA片段	0.2-2ug
2×dA Tailing Buffer	25μL
Taq DNA polymerase(5U/μL)	1μL
补水到	50μL
72℃保温2小时

三：反应后处理
加A反应后，Taq DNA pol