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长期
- 英文名:
C-EGFP plasmid(with CMV promoter)
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288
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)厂商,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)厂商
品牌:百奥莱博
英文名:C-EGFP plasmid(with CMV promoter)
编号:YT466
规格:1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒,用于表达C端含EGFP(Enhanced GreenFluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个EGFP的完整编码序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有EGFP标签的融合蛋白。利用EGFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用EGFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
本质粒的主要信息如下:
| Feature Nucleotide | Position |
| CMV promoter | 1-602 |
| T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
| Multiple cloning site | 651-740 |
| EGFP | 741-1460 |
| T7 promoter and T7 primer binding site | 1510-1531 |
| SV40 polyAsignal | 1543-1926 |
| f1 origin of ss-DNA replication | 2064-2370 |
| bla promoter | 2395-2519 |
| SV40 promoter | 2539-2877 |
| Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2912-3703 |
| HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3704-4162 |
| pUC origin | 4291-4958 |
本质粒(5010bp)的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因,构建的质粒可以用常规方法转染细胞。
储存条件:-20℃。
我公司的C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)厂商,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·雄激素受体抑制剂(恩杂鲁胺)(MDV3100)
编号:YT934
英文名称:Enzalutamide
规格:10mM×0.2ml|5mg|25mg
本品是一种androgen-receptor(AR)拮抗剂,在LNCaP细胞中IC50为36nM。
CAS:915087-33-1
分子式:C21H16F4N4O2S
分子量:464.44
纯度:99.6%
结构式:
Enzalutamide是雄激素受体(AR)拮抗剂,IC50为36nM。在加入16β-[18F]*-5α-DHT (18-FDHT)的竞争性实验中发现作用于AR时Enzalutamide比bicalutamide具有更高的亲和力。而Enzalutamide作用于LNCaP/AR(AR-过量表达)前列腺细胞时没有效果。在亲本LNCaP细胞中,Enzalutamide抑制前列腺特异性抗原(PSA)和跨膜丝*酸蛋白酶2(TMPRSS2)的产生,及抑制它们与合成的雄激素R1881结合。Enzalutamide可抑制突变AR蛋白(W741C,741位上的Trp突变为Cys)的翻译活性。MDV310也阻断核转位和配位受体复合物招募辅激活因子。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)厂商关键词:YT466,C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白),C-EGFP plasmid(with CMV promoter)
·RNase抑制剂(氧钒核糖核苷复合物)
编号:YT531
英文名称:RNase Inhibitor(RVC)
规格:2ml|10ml
本抑制剂氧钒核糖核苷复合物(Ribonucleoside Vanadyl Complexes, RVC)是一种常用的RNA酶抑制剂,浓度为200mM,广泛用于各种RNA样品的分离纯化和检测过程中以抑制RNA降解。
本产品通过一种优化的方法将四种rNTP的等摩尔混合物与氧化钒混合反应而成,可以和RNase以非共价键结合,形成稳定的复合物,从而抑制RNase活性。
本产品是一种常用的RNase抑制剂,可广泛用于各种需要防止RNA降解的RNA分离、纯化和检测过程。本产品可以用于mRNA的纯化过程中,作为RNase的抑制剂;也可用于细胞裂解和蔗糖梯度法细胞组分分离过程中,以抑制RNase活性;还可以用于原位杂交中保护RNA探针,以及DNase I消化DNA时保护RNA等。但本产品不适合用于体外翻译体系。
本产品可以抑制绝大多数核糖核酸酶,但以下是例外:DNase I、S1 nuclease及Bacillus cereusribonuclease。由于本产品不抑制DNase I,所以当用DNase I消化去除RNA样品中的DNA时,可以采用本产品来抑制RNase。
有报道称0.4mM以上浓度的RVC对PCR聚合酶有一定的抑制作用,所以本试剂不推荐直接用于反转录体系中,反转录体系中可以选用百奥莱博的另外一种RNase抑制剂(YT530)。也可以通过后续提到的方法抽提去除RVC后再用于PCR反应。
很多时候RNA样品中的RVC不必去除,可以直接用于后续的电泳、功能检测等。例如,使用本产品纯化获得的mRNA未经去除RVC,可以直接用于蛙卵的注射实验。
如果需要去除RNA样品中的RVC,可以直接使用等体积*酚进行抽提。如果*酚中含有抗氧化剂8-羟基喹*(代"啉")(8-hydroxyquinoline),抽提含有RVC的RNA样品后会发现*酚的颜色会变黑。当*酚抽提样品2-4次后,*酚的颜色不再明显变色,提示RVC已经被充分去除了。也可以在RNA沉淀前,加入RVC的摩尔数10倍量的EDTA以充分分解和失活RVC,这样可以在RNA沉淀时去除已经分解和失活的RVC。RVC浓度越高,对于RNase的抑制效果越强。参考图1,20mM的RVC可以完全抑制0.00025U/ml的RNase A。本产品浓度为200mM,一般细胞裂解液中推荐使用终浓度20mM,也可以根据经验或文献选择不同的浓度。每一批的本产品都经过RNase活性抑制的检测,检测结果参考下图。
不同浓度的RVC对RNase A的抑制效果图。总RNA和0.00025U/ml RNase A以及指定浓度的RVC一起孵育20分钟后进行电泳检测。本图仅作参考,不同的样品不同的检测条件,实际获得的结果可能和上图有所差别。
注意事项:
1. 第一次使用时建议分装,避免反复冻融。
2. 去垢剂SDS以及螯合剂EDTA可以抑制RVC的活性,请勿和RVC同时使用。
储存条件:-20℃,有效期一年。
C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)厂商关键词:YT466,C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白),C-EGFP plasmid(with CMV promoter)
BL0933 RBITC标记兔抗狗IgG抗体
BTN130995 Cy3-dCTP溶液 Cy3-dCTP Solution
MTT溶液 5mg/ml 10ml
150-25-4 N,N-双(2-)甘*酸 BICINE
葡萄糖酸* DTE 3632-91-5
ARB11193 人组织因子(TF)定量分析 Human tissue factor,if ELISA KIT
BL0839 羊抗人IgM纯化抗体
F040101 牛血清白蛋白偶联克伦特罗 BSA-CLE
HC0001 细胞培养皿
PY01-164 伊红Y(水溶) BS 25克
ARB13012 小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)含量测试 Mouse anti-thrombin Ⅲ,at-Ⅲ ELISA KIT
ARB12957 小鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa检测说明书 Mouse vascuolar cell adhesion molecule 1,vcam-1 ELISA KIT
Taq Plus DNA Polymerase
ARB11871 人糖蛋白130(gp130)酶联免疫定量检测 Human glucoprotein 130,gp130 ELISA KIT
F020221 兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)
北京百莱博科技有限公司是克隆与表达产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)厂商。
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文献和实验绿色荧光蛋白的表达、检测及应用 2013-11-27 12:42:10 来源: 评论:0 我要评论
突变的方式,把第65位丝氨酸换成苏氨酸或胱氨酸,荧光强度提高了4~6倍。后来的研究中用到的gfp突变体都是在此基础上通过改变若干碱基而得到的。 gfp作为一种新型的非酶性报告基因,能与多种不同蛋白质的N端或C端融合表达而不影响各自的特征,即融合蛋白质在细胞内仍能行使正常功能,而且融合蛋白保持与GFP 相似的荧光特性,所以应用范围很广。如,将目的基因与gfp融合,导入 生物 体内进行表达,然后观察融合蛋白在细胞内的位置。检测简便,不需要任何外源底物或辅助因子,是一种直观性很强
-Glu-Glu-Asp-Leu,这11个氨基酸作为抗原表位表达在不同的蛋白质框架中仍可识别其相应抗体。C-Myc tag已成功应用在 Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中, 可用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达。 eGFP eGFP标签蛋白,是增强型绿色荧光蛋白eGFP,激发波长为488nm,发射波长为507nm,其是由野生型绿色荧光蛋白GFP通过氨基酸突变和密码子优化而来的。相对于GFP,eGFP荧光强度更强、荧光性质更稳定。同时载体中构建
处理过的融合蛋白的2倍以上,这也说明标签的存在降低了该酶的活性。可以用固化了Cu2+的亲和层析柱去除切除的融合标签。 ■ 八种人趋化因子(Magis-trelli 2005)——所有的蛋白都在OrigamiTM B菌株中表达提高它们在胞质中的二硫键形成率。在趋化因子编码序列的C端引入了AviTMTag(亲和素)生物素化序列。切割后的细胞趋化因子可以用单体的亲和素树脂亲和层析与切割下的NusA标签和蛋白酶混合物分离开。所有切割纯化后的蛋白在细胞趋化实验中都显示了活性,而没有一个融合蛋白有这样的活性
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