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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
128
- 英文名:
X-a-gal
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-15℃
- 规格:
10mg|100mg
特别提示:包括α-半乳糖苷酶显色底物在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:α-半乳糖苷酶显色底物
英文名称:X-a-gal
产品货号:QN1031
产品规格:10mg|100mg
X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的显色底物,用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选,快速和简便地识别阳性的蓝色克隆,无需费时的β-半乳糖苷酶报告基因检测。
X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活,MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并zuì终产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色,即阳性的双杂交作用。
用途:
(1)α-半乳糖苷酶的显色底物,形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用,利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays;
(2)用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌;
(3)在组织化学中用于酶活性的检测。
储存液的配制及使用步骤:
A)涂布于预制平板:溶解24mg X-α-gal于6 mL DMF,终浓度为4mg/ mL的溶液。
①涂布200ul(15cm) 或者100ul(10cm)X-α-gal 储存液于预制平板上;
②放于37℃培养箱至液体被吸收(由于DMF挥发性低,zuì长可放4小时);
③将转化细菌或酵母涂于平板上,于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。
B)直接加入琼脂中:溶解60mg X-α-gal于3 mL DMF,终浓度为20mg/ mL的溶液。
①将已灭菌琼脂培养基冷却至50-55℃;
②往已冷却的培养基中直接加入2ml -10ml 20 mg/ml X-α-Gal储存液,混匀,快速倒平板。
CAS号:107021-38-5
分子式:C14H15BrClNO6
分子量:408.63
纯度:95%
性状:白色或灰白色结晶粉末,或者无色结晶
储存条件:-15℃避光避潮
除了α-半乳糖苷酶显色底物,,我公司还供应以下相关产品:
BTN90505 大肠杆菌BL21(DE3)化学感受态细胞 0.1mL*10
YT468 C端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白) 1μg
YT481 N端His标签融合蛋白质粒 1μg
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JN0126 BL21(DE3)感受态细胞(pKJE7分子伴侣) 100μl×10
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MQ0039 BL21(AI)化学感受态细胞 10×100μl/50×100μl
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文献和实验) 曝光或是图像设备采集。由于其同样具有持续的发光过程,因此也可以进行多次曝光。在尼龙膜上使用CSPD或CDP-Star底物的杂交,还可进行探针的拨离和重探。 NBT/BCIP 使用类似NBT/BCIP显色底物的好处就在于,检测的过程中不需要X胶片,既可以使用尼龙膜也可以是使用硝化纤维素膜。然而,如果想要获得高灵敏度的检测结果,可能就需要较长的时间了(几个小时)。这种方法也有其不足之处:首先这种方法只能一次性获得信号
实验过程: 1. 将SIGMA公司HRP标记的羊抗兔1:10,000开始,5倍稀释。 点1ul到NC膜上,点完后迅速泡到PBS里。 2. 配好发光底物后取出膜,将SuperSignal West Pico与ELC prime 分别加200ul到两块膜上。1min后,在膜表面覆盖塑料膜。 3. 照相 4. 将照相后的膜使用蒸馏水冲洗,然后加入TMB显色底物显色,看两膜显色深浅有无差别。 结果:1. 发光情况 30s结果 1m30s 5m
I采用了显色法,使用显色底物 NBT/BCIP;而Starter Kit II选用化学发光法底物CSPD。 如果您用来合成探针的DNA模板的量比较少或是质量不够高的时候,建议您使用PCR DIG Probe Synthesis Kit。该试剂盒专用于制备高灵敏度的杂交探针,例如单拷贝的基因。其另一个特点就是实验中无需定量斑点检测过程,通过定量凝胶电泳就可以快速确定PCR标记探针的效率。
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