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上海博湖
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38
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贴壁/悬浮
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 器官来源:
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- 是否是肿瘤细胞:
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- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
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- 物种来源:
人/小鼠/大鼠/其他
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细胞描述
人前脂肪细胞培养试剂盒脂肪细胞在能量储存和代谢过程中有着重要的作用。脂肪细胞分化是一个发展的过程,它对代谢稳态和营养信号很重要。它由复杂的过程控制,如基因表达和信号转导。前脂肪细胞存在于成人脂肪组织中,能根据能量的平衡增殖和分化成熟的脂肪细胞。前体细胞的增殖和分化能够增加脂肪组织的体积。在体外培养中,不同的组织来源前脂肪细胞的油脂含量,成脂转录因子表达和TNFalpha诱导的凋亡均有不同。同时研究表明它还与脂肪分化以及许多生理病理过程密切相关,如脂肪代谢、能量平衡、肥胖、糖尿病、高血脂和乳癌。 虽然脂肪组织机械韧性很强,但利用本公司试剂盒中提供的脂肪组织分离体系来分离,EDTA/EGTA处理过的薄的脂肪组织片能使得脂肪组织中前脂肪细胞的一些功能特性发生改变,从而将前脂肪细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的前脂肪细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件,分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外,本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系,可以最大程度地降低所培养的前脂肪原代细胞中成纤维细胞的含量。 人前脂肪细胞培养试剂盒适合于培养人的前脂肪组织细胞。本试剂盒包含: (1)OptiTDSTM人前脂肪细胞组织解离液(3×1ml) (2)人前脂肪细胞组织处理缓冲液(100ml) (3)FibrOutTM人前脂肪细胞成纤维抑制剂(1ml(500x)) (4)人前脂肪组织洗液(5x100 ml) (5)人前脂肪细胞生长因子(1ml 500x)及血清(5x10ml) (6)人前脂肪细胞基础培养基(5 x100ml) (7)人前脂肪组织预备液(1 x100 ml) (8)人前脂肪细胞培养试剂盒使用说明书
人前脂肪细胞培养试剂盒细胞图片:
细胞种类
人前脂肪细胞培养试剂盒冻存
对培养的细胞进行冻存的最佳方法是将细胞置于含有(DMSO)等冷冻保护剂的完全培养基中于液氮中储存。冷冻保护剂可降低培养基的冰点,并可减缓冷却速度吗,大大降低冰晶形成的危险 (冰晶可损伤细胞,导致细胞死亡)。
注:DMSO 可促进有机分子进入组织。操作含DMSO的试剂时,应采用与此类物质安全危害相适应的设备和操作规范,并应按照当地法规处置此类试剂。
细胞冻存指导原则
冻存细胞系以备将来之用时,必须遵守以下原则。与其他细胞培养操作一样,我们建议您严格遵守您所用细胞系附带的操作说明,以便获得最佳结果。
1)在高细胞浓度情况下进行培养细胞的冻存,并且细胞传代次数尽可能少。确保冻存前活细胞百分比至少为90%。请注意最佳冻存条件取决于所用细胞系。
2)细胞应缓慢冷冻,可使用可控制降温速度的低温冰箱或者低温冷冻容器使温度每分钟大约降低1°C。
3)必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂
4)将冷冻的细胞于 -70°C 以下温度储存;温度高于 -50°C 时,冷冻的细胞将开始变质。
5)必须使用无菌冻存管储存冷冻的细胞。装有冷冻细胞的冻存管可浸于液氮或者在液氮上方的气相空间内保存
6)必须穿戴个人防护设备。
7)所有与细胞接触的溶液和设备均应为无菌状态。必须采用正确的无菌技术,并且在层流通风橱内进行。
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文献和实验吸管反复吹打使组织块分散,然后通过孔径25μM(200目)的筛网过滤,收集滤液和未过滤的组织块。5、将滤液以600g离心5分钟弃上清,加入原代培养的基础培养基制成细胞悬液。6、将未滤过的组织按照上述过程再处理一次,将俩次获得的细胞悬液混匀计数,按照104个/cm2的密度接种于培养瓶里,于37度,5%CO2培养箱中培养。接种12-16小时基本贴壁。在增殖状态下的前脂肪细胞可以使用胰蛋白酶消化的方法传代,并且可以冻存和复苏。
,收集滤液; ⑤ 将最后得到的滤液离心(700g,7—10min)。吸弃漂浮的脂肪细胞和消化液; ⑥ 用培养液a清洗细胞,离心(700g,7min)。将细胞团制成悬液,再离心。最后,将细胞沉淀用培养液a重新制成细胞悬液。 3. 原代培养; ① 用培养液a调节细胞密度。将细胞以1.5×104个/cm2 的密度接种于培养板中; ② 24h后,用DW培养液彻底清洗细胞,除去培养物中残留的胎牛血清和未贴壁的细胞(主要为红细胞); ③ 换入培养液b,在37℃、5%CO2 培养箱中培养
甲腺原氨酸(T3 )200pmol/L; 8. 筛网:孔径为25μm的尼龙网筛。 实验方法: 1. 取材 ① 取用普通食物喂养的4周龄雄性大鼠,乙醚麻醉后断头处死; ② 在无菌条件下从附睾周围切取脂肪垫,放入培养皿中。尽量除去血管。然后用清洗液冲洗3次; 2. 分离细胞 ① 充分剪碎所取脂肪细胞。然后放入消化液中,37℃水浴中振荡消化40
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