Western半干法转膜液(固体)(1×干粉)

特别提示：包括Western半干法转膜液(固体)(1×干粉)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Western半干法转膜液(固体)(1×干粉)
产品货号：ZN1899
产品规格：1包

产品保存：室温保存，一年有效。
产品简介：
Western 半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液，没有使用剧毒的*醇。配制 Western 半干法转膜液的方法非常便捷，不需要调节 pH值。本 Western 转膜液共 1 瓶，可以配制 1 升 Western 半干转膜液。
使用说明：
1．将 Western 转膜液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约700 毫升，溶解。
2．加入 200 毫升无水乙醇，混匀。
3．定容到 1 升。混匀后即可使用，无需调节 pH 值。
注意事项：
1．配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存。如果颜色变成浅棕色或黄褐色，应丢弃。
2．需使用分析纯级别及以上级别的乙醇。

除了Western半干法转膜液(固体)(1×干粉),，我公司还供应以下相关产品：



名称：Western二抗稀释液
货号：YT070
规格：100ml
本品可以用于Western时二抗的稀释。经本Western二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。按照每个二抗稀释10毫升计算，一个包装的Western二抗稀释液可以稀释10个或10次二抗。

注意事项：本Western二抗稀释液经过滤除菌处理，使用过程中应尽量避免细菌污染。一旦启用后建议在一个月内用完，如果发现有沉淀或细菌污染请弃用。

储存条件：4℃，有效期一年。

名称：彩色预染高分子量蛋白质标准(10-20次)
货号：ZN1885
规格：100μl
产品保存：-20℃保存，一年有效。
产品特点：
条带窄，易辨认。
颜色稳定。
明亮的参考条带。
宽分子量范围。
即用型 一可直接凝胶上样。
产品应用：
监控蛋白的SDS-聚*烯酰胺凝胶电泳迁移。
监控免疫印迹杂交的蛋白转膜效率。
SDS-聚*烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹杂交确定蛋白大小。
产品说明：
预染蛋白 Ladders/marker 设计用于监控蛋白的SDS-聚*烯酰胺凝胶电泳分离、验证免疫印迹时蛋白转移至 PVDF、尼龙和硝酸纤维膜的效率、粗略鉴定蛋白大小等应用(1-3)。这些预染的蛋白分子量标准由预染的原核生物重组蛋白组成，是预染的天然蛋白的混合物。彩色预染高分子蛋白质 marker 是一个四色的分子量标准，含有 10 种蛋白，分子量范围为10 - 260 kDa。四种不同的发色团与蛋白结合产生明亮的彩色分子量条带，带型容易记忆。
使用方法：
1.室温或37℃融化 Ladder几分钟，确保试管中的固体完全溶解，不要煮沸。
2.轻轻混匀，确保溶液完全混匀。
3.上样:
小凝胶：5μl/泳道，凝胶厚度 0.75-1 mm。
大凝胶：10μl/泳道，凝胶厚度 1-1.5 mm。

名称：超敏ECL化学发光即用型底物3.0
货号：ZN1941
规格：25ml×2/50ml×2
产品保存：4℃避光保存，一年有效。
产品规格：
100ml 工作液(可用于 1000cm2的膜)
溶液 A 50ml
溶液 B 50ml
产品说明：超敏ECL化学发光试剂盒，是一种基于鲁米诺的增强型化学发光(ECL)HRP 底物，发光效果显著优于超敏 ECL 化学发光，可发出稳定的光信号，适用于通过CCD 成像仪检测中等飞克级的蛋白，当底物与优化的抗体浓度和封闭缓冲液配合使用时，可检测到常规 ECL 底物无法检测的低丰度靶蛋白及zuì佳发光持续时间。
产品特点：
1.用于辣根过氧化物酶(HRP)的化学发光底物
2.使用适当的一抗和二抗时，可在 NC 膜或PVDF 膜上检测丰度为中等飞克级的蛋白条带3.所得信号的可定量检测范围跨越两个数量级
4.通过胶片或成像系统进行曝光，易于捕获图像
5.配方经过优化，可适用于低浓度的抗体检测
7.用于辣根过氧化物酶(HRP)检测的增强型化学发光底物，具有高灵敏度和长信号持续时间8.即刻生成稳定信号，可通过胶片或CCD 成像系统方便地实现检测
9.工作液在 24 小时之内保持稳定；试剂盒可稳定放置长达1年
重要产品信息：
好的免疫印迹结果需要优化实验条件，包括样品量，凝胶类型，转移方法，膜类型，封闭剂，洗涤缓冲液，一抗浓度，二抗浓度和孵育时间等。
1.为获得zuì佳效果，在孵育步骤中使用摇床。
2.不要使用叠*化钠作为缓冲液的防腐剂，因为它会抑制 HRP。
3.始终戴上手套或使用干净的塑料镊子。金属装置必须没有可见的生锈痕迹，这可能导致斑点和/或高背景。
4.工作液暴露在阳光下或任何其他强光下都可能损害工作液使用效果。
5.由于阻断剂与抗体的交叉反应性引起非特异性信号，所以实验测试对于确定每种蛋白质印迹系统的适当封闭剂是至关重要的。阻止缓冲区也会影响系统的灵敏度。
6.当使用抗生物素蛋白/生物素系统时，避免使用牛奶作为阻断剂，因为牛奶含有不同量的内源性生物素，导致高背景信号。
7.使用足够量的洗涤缓冲液，封闭缓冲液，抗体溶液和底物工作溶液来覆盖印迹并确保其永不变干。使用大的封闭和洗涤缓冲液体积可以使非特异性信号zuì小化。
8.将 Tween-20洗涤剂(终浓度为0.05-0.1%)加入到封闭缓冲液和所有稀释的抗体溶液中，以减少非特异性信号。
注意事项：
1.A 液和 B 液吸取过程中必须更换移液器枪头，避免相互污染失效。
2.A 液和 B 液混合为工作液后，需避免强氧化剂如次氯酸*等对工作液的影响。
3.须确保试剂瓶干净，无微生物或其它试剂污染。
4.为了您的安全，请穿实验服并佩戴一次性手套。
需要材料：
NC 膜或PVDF 膜
X 射线胶片或成像系统
摇床
洗涤缓冲液：含有 0.05-0.1%吐温 20的洗涤液，PBS：10mM 磷酸钠，150mM NaCl，pH7.2 TBS：10mM Tris，150mM NaCl，pH7.4
特异性的一抗，用洗涤缓冲液或封闭缓冲液稀释
HRP 标记的二抗，特异性针对一抗，用洗涤缓冲液或封闭缓冲液稀释
封闭液：洗涤缓冲液中 1-5%(w/v)封闭剂(例如酪蛋白，BSA或脱脂奶粉)
注意：我们的ECL底物与所有封闭缓冲液兼容
使用说明：
1.室温封闭膜60分钟，同时摇动。
2.去除封闭液并添加一抗。在室温振荡培养 1 小时或在 2-8℃过夜振荡。
3.将膜悬浮于清洗缓冲液中摇动 5分钟以上。更换清洗缓冲液至少 4-6次。增加洗涤缓冲液体积，洗涤次数和洗涤持续时间可能有助于使背景信号zuì小化。
4.在室温下孵育二抗 1 小时，同时摇动。
5.重复步骤 3，去除未结合的HRP 结合物。
注意：与 HRP 结合物孵育后，膜必须彻底清洗。
6.通过混合等量的检测试剂 A和 B 来制备底物工作溶液。每平方厘米膜使用 0.1mL 工作溶液。
7.在室温下用工作液孵育印迹膜 1-2分钟。
8.将印迹膜放在透明的保鲜膜或保护膜中。使用吸收性的纸巾去除多余的液体，小心地将气泡压出。
9.将印迹膜放在×光胶片或成像系统上显色。底物孵育后的30分钟内，发光zuì强烈。