Transcriptor High Fidelity cDN

Transcriptor高保真cDNA合成试剂盒

Transcriptor High Fidelity cDNA Synthesis Kit

General description

Transcriptor高保真逆转录酶混合物，用于最长达到14 kb的RNA的高保真两步法RT-PCR。

Transcriptor高保真cDNA合成试剂盒的核心成分是Transcriptor高保真逆转录酶，该酶是一种混合物，含有经过基因重组的逆转录酶及具有校正调节功能的酶。两种酶的协同作用使其混合酶在逆转录RNA模板时可以获得比其他常用转录酶高7倍的保真度。
Transcriptor高保真逆转录酶混合物能有效逆转录长达14 kb的模板。该混合酶具有高热稳定性以及特别优化的缓冲体系，使整个逆转录过程可以在高达55°C的温度下进行。因此，无需添加任何附加成分，就可以解决具有复杂二级结构的高GC含量模板的逆转录问题，而这些附加成分可能会影响逆转录反应的准确性。

混合酶中的重组逆转录酶来自于大肠杆菌（E. coli）。该酶具有依赖于RNA的DNA聚合酶活性、依赖于DNA的DNA聚合酶活性、解旋活性及可降解RNA:DNA杂合体中RNA的RNase H酶活性。因此，在逆转录后，不再需要耗时的RNase H孵育步骤，从而缩短了反应时间并降低了实验成本。

Transcriptor高保真cDNA合成试剂盒提供了第一链cDNA合成反应过程中所需的所有试剂。该试剂盒支持三种不同引物系统的逆转录过程。该试剂盒提供了两种cDNA合成引物：随机六聚体引物和锚定oligo(dT)₁₈ 引物。其中，锚定oligo(dT)18引物可保证引物结合在poly(A) 尾的起始位置，有效避免引物结合在poly(A) 尾的中间位置，从而获得全长cDNA。长mRNA的5′ 端序列往往不完全，而锚定oligo(dT)18可保证获得全长cDNA，因此是大多数应用的选择。随机六聚体引物可结合在全长RNA上，在所有RNA序列上具有一致的性能，可用于逆转录不带有poly(A)尾结构的RNA。试剂盒还提供了具有热稳定性的保护RNA酶抑制剂（Protector RNase Inhibitor），可保护RNA在高反应温度下不被降解。