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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
192
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
1mL
特别提示:包括农杆菌EHA101菌种在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:农杆菌EHA101菌种
产品货号:BTN12-285
产品规格:1mL
除了农杆菌EHA101菌种,,我公司还供应以下相关产品:
名称:裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒
货号:BTN100103B
规格:20次
本裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理,高效快速制备裂殖酵母化学感受态细胞,用于长期冻存以备后续转化的产品。
产品特点:
1.一次制备,-80℃保存,多次使用,免去每次转化都要制备裂殖酵母感受态细胞。
2. 操作简单,单溶液制备,除酵母培养的时间外,整个操作只需要30分钟。
3. 主要用于裂殖酵母S. pombe ,其他多种实验用酵母菌株最好选用酵母化学感受态细胞制备试剂(BTN81109)。
4. 受体酵母可以不含质粒,也可用于携带有选择性质粒的酵母(如双杂交体系中的酵母)。
5. 最高转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化,例如YIp,YRp,YCp,YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变、基因破坏、等位突变基因修复等实验。
8. 本产品可以制备20只裂殖酵母感受态细胞(需要100mL裂殖酵母培养液),其中A型只用于制备感受态细胞,B型还带高效转化液。
试剂盒组成:
| 组分 | BTN100103A | BTN100103B |
| 溶液A | 1ml | 1ml |
| 高效裂殖酵母转化液 | - | 一套(20次) |
| 使用说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用效果:
将一个酵母菌落接种到SLD培养基中,30℃摇晃培养直到OD600达到0.6-1.0,冰浴15分钟后离心弃上清,用自备无菌水洗涤三次,然后用相当于菌液最初体积百分之一的溶液A重悬,按每管50μl分装,放-80℃保存。
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文献和实验双元载体的农杆菌转化1.1农杆菌感受态细胞的制备1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养。1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中,220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中,28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。1.1.4. 转入无菌离心管,5000rpm离心5min,去上清液。1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置
一.农杆菌感受态细胞的制备 (同大肠杆菌质粒DNA的提取),然后将其转化大肠杆菌,再提取大肠杆菌的质粒DNA进行酶切鉴定。取-70℃保存的EHA105于含有50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养2天。挑单菌落接种于5ml YM(0.5g/L KH2 PO4 ,10 g/L Mannitol,2 g/L L-Glutamine,0.2 g/L NaCL,0.2 g/L MgSO4 ,0.3 g/L Yeast extract,PH7.0)液体培养基中,220rpm,28℃振荡培养18 hr
1双元载体的农杆菌转化 1.1农杆菌感受态细胞的制备 1.1.1. 取-70℃保存的EHA105于含50μg/ml链霉素平板划线,28℃培养。 1.1.2. 挑取单菌落接种于5ml YM液体培养基中,220rpm 28℃振荡培养12-16 hr。 1.1.3. 取2ml菌液转接于100ml YM液体培养基中,28℃220rpm振荡培养至OD600=0.5。 1.1.4. 转入无菌离心管,5000rpm离心5min,去上清液。 1.1.5. 加入10ml预冷的0.1M的CaCl2溶液
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